作用机制:
佐剂增强免0疫应答的机制可能有:①改变*原物理性状,延长*原在机体内的存在时间和保持对免0疫系统的持续激0活作用,佐剂中的矿物油成分主要起缓释作用,有利于*原在体内缓慢释放,延缓*原在体内降解,从而更有效地刺激免0疫系统。②使*原易被巨噬细胞吞噬,刺激单核巨噬细胞系统,增强其对*原的处理和呈递*原的能力。③促进淋巴细胞的增殖、分化,从而扩大和增强机体的免0疫应答的效应。
【摘要】 目的建立一种快速制备甲胎蛋白单克0隆*0体(AFP—McAb)杂交瘤细胞系的方法。 方法 以常规和改良两
种方式同时免0疫8~12周Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨0髓瘤细胞SP2/0融合并行次黄*呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养。
用间接酶链免0疫吸附试验法(EI。ISA)筛选阳性克0隆株,并建立细胞系。 结果 在较短时间内,改良法能获得高0效价的免0疫
*0体,与常规免0疫法相比有*显著差异(Plt;0.001),同时改良法的细胞融合率和*0体阳性率也显著高于常规免0疫法
(Plt;o.001)。筛选获得的高0效分泌*人AFP—McAb的阳性杂交瘤细胞珠进行了初步鉴定。 结论 新的改良方法优化了
常规的McAb制备中动物免0疫程序,并能成功筛选出AFP—McAb杂交瘤细胞系。
饲养层细胞制备
于细胞融合*天,准备饲养层细胞,常选用小鼠腹腔渗出细胞,其中主要是巨噬细胞和淋巴细胞。应用腹腔渗出细胞的好处是: 一方面做饲养细胞,快速佐剂,另一方面巨噬细胞可以吞噬死0亡的细胞和细胞碎片,为融合细胞的生长造成良好的环境。腹腔细胞的数目应适宜,过少则不能提供杂交瘤细胞所需要的生长因子,过多会阻碍杂交瘤细胞的贴壁,一般以铺满孔底 30% 为好。