QuickAntibody系列免0疫佐剂有哪些特点?
与常规使用的弗氏佐剂相比,QuickAntibody免0疫佐剂具有免0疫周期短、针次少、无需乳化、*原用量低、*0体滴度高、*0体亲合力高、易获得构象型表位的*0体等多方面优点,2周快速鼠多*制备佐剂,详述如下:
1. QuickAntibody只需两针免0疫,无论是用于单克0隆还是多克0隆*0体制备,与弗氏佐剂相比可减少免0疫针次。
2. QuickAntibody通过减少免0疫针次和降低每针次*原用量,从而可大大节省总*原用量。推荐使用的*原用量为(1)免0疫原性较弱的亚单位蛋白*原每针次5-50μg(通常为小鼠5-20μg,
兔子20-50μg);(2)免0疫原性较强的灭活全病毒或全*以及病毒样颗粒*原每针次1-10μg(通常为小鼠1-5μg ,兔子5-10μg)。
材料与方法
一、材料
AFP购自上海领潮公司。SP2/0骨0髓瘤细胞(中科院上海细胞库)。8~12周龄Balb/c小鼠(第四军0医大学实验动物中心)。SPF级。
二、方法
1.动物免0疫:将4只8~12周龄Balb/c小鼠随机分为两组,每组2只,分别命名为1号和2号(第yi组)、3号和4号(第二组)。第yi组按常规免0疫方法进行免0疫一…,第二组采用改良的免0疫方法进行免0疫。免0疫前静脉采集少量血液,析出血0清作为后续检测的阴性对照血0清。
第yi组:AFP50ug(50肚1)与等量福氏完全佐剂(Sigma,美国)混合,充分乳化后注入8~12周龄Balb/c小鼠腹腔,2周后用同量*原加不完全福氏佐剂(Sigma,美国)腹腔注射,4周后用同量*原加不完全福氏佐剂腹腔注射,融合前3 d作腹腔注射加强免0疫。
结 果
一、两种免0疫方式小鼠血0清效价比较
对两组试验动物在完成了基础免0疫后,尾静脉采集少量血液,分离血0清,进行间接ELISA测定*0体效价,检测结果见图1。由图中数据可知,新的改良免0疫方法,在第二次免0疫后,*0体效价即达到1:104。两组数据经生物学统计软件SPSS(Windows 13.0版)进行t检验,统计结果差异*显著(P(0.001)。
二、两种免0疫方式小鼠融合率比较
在细胞融合后约7~10 d可见孔内杂交瘤细胞生长,当细胞融合成片达孔底面积的35%~50%时,用ELISA检测特异性*0体。两组免0疫小鼠细胞著。改良法耗费时间短,但获得的*0体效价更高。