产品介绍
生物素/亲合素-HRP 系统提供在冰冻切片、石蜡包埋组织和细胞涂片中细胞表面*原和胞内*原快速和精0确定位的方法。*盒包括正常山羊或兔血0清、生物素标记的二*和亲合素标记的 HRP。此系统与兔、小鼠来源的一*使用。非特异性染色用与二*同种动物的血0清封闭。组织、细胞片与未标记的一*反应后,加生物素标记的二*,孵育后,洗去二*,与亲合素辣根酶孵育,洗去后加底物。
*盒组成
1. 洗涤缓冲液(10×浓缩):100ml×2
2. 血0清封闭液:含 10%灭活正常山羊,含防腐剂:50 ml
3. 生物素标记的二*:含 2.0 μg/ml,0.01M PBS,pH7.4,稳定剂和防腐剂,工作液。规
格:山羊*兔 50ml;或山羊*小鼠 50ml
4. 亲合素-HRP,含 2.0 μg/mL,0.01M PBS, pH7.4,稳定剂和防腐剂,工作液,规格:亲
合素-HRP 50ml
操作步骤
石蜡切片
1. 脱蜡:二甲0苯,室温,2 次,每次 5~10min。
2. 水合 100%、100%、95%、90%、80%、70%乙醇、蒸馏水,每级 3min。
3. 在洗涤缓冲液中润洗 10min。
4. 如有必要,封闭内源性过氧化物酶(含 0.3% H2O2 无水甲0醇)
5. 继续通用步骤。
冰冻切片
1. 空气中干燥切片,至少 1hr
2. 用前用合适的固定液固定,生物素标记*兔,如果要延长保存时间,固定后在空气中干燥 1hr。 单独包装在铝箔袋中,–70°C 干燥保存,用前从冰箱取出,室温放置至少 1hr。
3. 浸入洗涤缓冲液中 10~15min。
4. 如有必要,封闭内源性过氧化物酶(含 0.3% H2O2 无水甲0醇)。
5. 继续通用步骤。
内源性碱性活性在很多细胞和组织中很强,如膀胱上皮细胞、卵0巢固有层、shen脏和唾液腺。小0肠碱性*酶常见于在小0肠上皮细胞的刷状缘;人0胎0盘的碱性*酶常见于胎0盘合体滋养层细胞的微绒毛;在细胞涂片中,碱性*酶见于嗜中性分割细胞,嗜中性带细胞,和嗜中性晚幼粒细胞。碱性*酶也见于慢性和急性粒细胞白0血病以及某些嗜中性粒细胞白0血病反应。