用细胞融合术建立杂交瘤细胞时,小鼠单*Ig类亚类鉴定用酶标二*即用套装,饲养细胞的加入是不可缺少的,常用的有正常小鼠腹腔巨噬细胞、脾细胞、胸腺细胞,也有人用经过照射或丝0裂霉0素处理的纤维母细胞,如3T3或Putler等。克0隆化培养方法常用如...单克0隆*0体制备过程中的专一*0体检测阳性的检测原理是什么
单克0隆*0体制备过程中的专一*0体检测阳性的检测原理是什么。首先依*0体的分泌情况筛选出高*0体分泌孔,将孔中细胞再行克0隆化,尔后进行...杂交瘤单克0隆*0体制备常见问题解答
杂交瘤筛选杂交瘤细胞的获得是单克0隆*0体制备的基础,但是如何从复杂的细胞群体中获得高质量*0体还需要通过高通量的筛选技术。
常规筛选平台中,我们采用的是手工排*和96孔板进行筛选。依赖实验人员的手工操作、筛选通量低,并且数据不可追0踪。同时也需要实验人员非常合理有效的安排实验、避免人为失误,尤其是在阳性样品Hit Picking时,从成千上万个样品中挑选阳性样品,且不能出错,这对实验人员是个非常大的挑战。
工作浓度:
1. 融合和亚克0隆阶段:10% (v/v) 加入到完全培养基中。
2. 细胞扩大培养和复苏阶段:2.5%-5% (v/v) 加入到完全培养基中。
注意:Hybridoma Feeder 添加因子适用的基础培养基为RPMI 1640、IMDM和DMEM,其它培养基未经测试。Hybridoma Feeder 添加因子不可代替血0清使用,只作为细胞培养添加剂使用。