甲胎蛋白(AFP)是一种胎儿特异性糖蛋白,分子量约70,000~72,000道尔顿^,在胚胎肝0脏和卵黄囊中合成,正常人血中含量甚微。1972年有人首0次报道开放性神0经管畸形胎儿、羊水中有高水平的AFP。若胎儿羊水中AFI’值高于均值常见于患无脑儿或脊柱裂的胎儿,亦见于其他多种畸形,如先0天性shen病、食道或肠闭锁、囊0性水瘤、骶尾部畸胎瘤、Rh血型不和、先天愚型、先0天性性腺发育不全等。1983年发现母体血0清AFP水平的降低与唐氏综合征有密切关系一。因此制备高0效特异的AFP单克0隆*0体(McAb)具有重要的意义。
分类
1.生物性佐剂是*或其产物,其本身具有免0疫原性,如分枝杆0菌(结0核杆0菌、卡介苗)、短小棒状杆0菌、百0日咳杆0菌、革兰阴性杆0菌内毒0素等。此外发现粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素-l、白细胞介素-2、干扰素-γ等的佐剂活性。2.无机佐剂如氢氧化铝、明矾、*铝等。3.人工合成佐剂双链多聚肌苷酸、胞苷酸、双链多聚腺苷酸。4.油剂花生油乳化佐剂、矿物油、植物油、羊毛脂等。5.弗氏佐剂弗氏佐剂又分弗氏不完全佐剂和完全弗氏佐剂,是目前动物实验中*常见的佐剂,但易在注射局部形成肉芽肿和持久性*,因此不适用于*使用。近年来,人工合成胞壁酰二肽作为卡介苗细胞壁中的一种成分,用于提高疫0苗的接种效果,是对*无不良反应的有效佐剂。
1. 第21天按同样方式加强免0疫1针。备注:每次佐剂和*原现配现用。
2. 第35天采微量血进行ELISA测定,*0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行*原冲击免0疫和脾细胞融合。
3. 若*0体滴度没有达到要求,可在第42天按同样方式加强免0疫1针。备注:通常情况下小鼠只需免0疫2针,而家兔往往需要免0疫3针。
4. 若免0疫3针,可在第52-56天采微量血进行ELISA测定,弗氏完全佐剂,*0体滴度应在1:10000-1:1000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行*原冲击免0疫和脾细胞融合。备注:佐剂免0疫效果有时也与*原特性有关,若免0疫3针后仍达不到要求,不建议进行更多针次免0疫。