操作流程
1)收集对数生长期的细胞(5x105-1x107个细胞)
2)用1mL该细胞冻存液悬浮细胞,置于冻存管中,不需预冷,直接-80℃冷冻保存,也可用液氮快速冷冻细胞
3)用恒温箱或者水浴锅快速复苏细胞
*冷冻细胞必须处于对数生长期
无菌检测**
内毒0素:生色底物法
支原体:荧光*0体法
*和*:依据日本药典
(**:可索取检验证书)
BAMBANKER? Direct
BAMBANKER
Direct是“无血0清型”细胞冻存液。
1. QuickFreezing-M不含牛血0清或其他蛋白成分,因而同样适用于无血0清培养的细胞冻存。
2. QuickFreezing-M不含牛血0清或其他蛋白成分,因而非常适合用于冻存那些在使用常规含牛血0清冻存液过程中容易聚团的细胞,如各种293细胞等
3. QuickFreezing-M的包装设计为10ml×5,因而无需再次分装,而且在使用过程中不易造成不同使用者或不同细胞间的交叉污染。
4. QuickFreezing-M经过Hela、RD、HEK-293、293T、SP2/0、K562 和P815等多种细胞的测试,复苏后细胞存活率均高于用常规含牛血0清冻存液冻存的细胞。
5. QuickFreezing-M建议常温运输,-20℃保存,无菌取用,有效期18个月。
存储条件
储存于4℃以下,质量保障期从产品的生产日期起,为期两年。3个月以上没有使用冻存液计划时,尽可能-20℃冷冻保存。为避免重复冻融过程可能导致的冻存液品质下降和性能降低,推荐将产品分装成小管后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱冻存。
冻存细胞复苏步骤:
1、 从冰箱中取出冻存的细胞,立即置于37℃水浴槽中快速解冻。
2、 待冻存管中的细胞混合液完全融化后,立即加入1ml细胞培养基于冻存管中与细胞混合,将其中的混合液移至含有约5ml该细胞培养基的离心管中,1000rmp离心5分钟,快速细胞冻存液,收集冻存细胞沉淀,移去上清液(注意勿将细胞沉淀倒掉)。
3、 加入适量的新鲜培养基,使用移液管缓缓加入细胞沉淀中,轻柔混匀,将混匀好的细胞移至事先准备好的培养容器中。
4、 镜检观察,待细胞状态恢复后可进行其他研究或者培养处理。