人Klotho蛋白ELISA*盒

人Klotho蛋白（Klotho）*盒（ELISA）

l 本*盒用于体外定量检测****、血浆、*、细胞上清及相关液体样本中人Klotho蛋白（Klotho）的含量。

l 有效期：6个月

l 保存条件：2-8℃

l 本*盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断

实验原理

*盒采用双*一步夹心法酶联****吸附试验（ELISA）。往预先包被人Klotho蛋白（Klotho）捕获*的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测*，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成****终的*。颜色的深浅和样品中的人Klotho蛋白（Klotho）呈正相关。用*在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

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样本处理及要求

1.  ****：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2.  血浆：可用EDTA或肝素作为*凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.  *匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗*，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将*剪碎。将剪碎的*与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的*样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶*）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解*细胞，可以对匀浆液进行超声*碎，或反复冻融。****后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

4.  细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响****后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。