大象皮质醇(Cortisol)*盒(ELISA)
l 本*盒用于体外定量检测****、血浆、*、细胞上清及相关液体样本中大象皮质醇(Cortisol)的含量。
l 有效期:6个月
l 保存条件:2-8℃
l 本*盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断
实验原理
*盒采用双*一步夹心法酶联****吸附试验(ELISA)。往预先包被大象皮质醇(Cortisol)捕获*的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测*,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成****终的*。颜色的深浅和样品中的大象皮质醇(Cortisol)呈正相关。用*在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
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样本处理及要求
1. ****:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为*凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. *匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗*,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将*剪碎。将剪碎的*与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的*样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶*)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解*细胞,可以对匀浆液进行超声*碎,或反复冻融。****后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响****后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。