武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种*1体、*学*盒、生化*、ELISA*盒、分子生物学*等多用途多属种的*产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、*学等生命科学领域。
采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色,而导致检测的不准确性。同时也应避免*污染,因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。
2、 血浆
用含*凝剂的采血管或离心管采集血液标本,标本采集后30min内4℃ 1000×g离心15min,取上清即血浆。将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。避免使用溶血或高血1脂的标本。
常用的*凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等,检测时还应仔细阅读*盒说明书,检查*盒是否对*凝剂有特殊要求。
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机体被微生物感1染后,先产生IgM*1体,然后产生IgG*1体。经过一段时间,IgM*1体量逐渐减少而消失,而IgG*1体可长期存在,在疾病痊愈后可持续数年之久。
IgM*1体一般为保护性*1体具有*性。因此IgM*1体的测定,对某些传1染病如甲型肝1炎有较高的临床诊断价值。右图为为甲型肝1炎病1人血1清中IgG*1体和IgM*1体出现的时间和水平。
1.3 *原*1体反应
1.3.1 可逆性
*原与*1体结合形成*原*1体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为:
Ag Ab→Ag·Ab
*1体的亲和力(affinity)是*原*1体间的固有结合力,可以用平衡常数K表示:
K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab]
Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力*1体的*原结合点与*原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的*原或*1体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法来提纯*原或*1体。在*血1清中,特异性的IgG*1体仅占总IgG中的*1小部分。用亲和层析法提取的特异性*1体,称为亲和层析纯*1体,应用于*测定中可得到更好的效果。
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4)加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中*原的量。在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子*原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检*原的异性*1体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如*1体的来源为*血1清,包被和酶标用的*1体*1好分别取自不同种属的动物。如应用单克1隆*1体,ELISA*盒供应商,一般选择两个针对*原上不同决定簇的单*,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标*1体一起保温反应,作一步检测。