武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种*1体、****学*盒、生化*、ELISA*盒、分子生物学*等多用途多属种的*产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、****学等生命科学领域。
1、染色过强 原因 解决办法 *1体的浓度过高或*1体孵育时间过长 降低*1体滴度(一般指浓缩性*1体)*1体孵育时间:室温1 小时或4℃过夜 孵育温度过高,孵育温度超过37℃ 一般室温20-28℃ DAB 显色时间过长或 DAB 浓度过高 显色时间不能超过5-10分钟,以显微镜下观察为准 2、非特异性背景染色 原因 解决办法 操作过程中冲洗不充分 每步冲洗3×5 *中含过氧化物酶未阻断 可再配置新鲜3%H2O2封闭,孵育时间延长 *中含内源性生物素 正常非****动物血1清再封闭 血1清蛋白封闭不充分 延长血1清蛋白封闭时间
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1.2.1 *1体的结构
*1体是能与*原特异性结合的****球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与****测定有关的Ig主要为 IgG和IgM。Ig由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig的轻链是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda)两种型别。五类Ig的重链结构不同,这决定了它们的*原性也不同。IgG和IgM的重链分别称为γ(gamma)链和μ(mu )链。
重链和轻链的 N端的氨基酸排列顺序因各种*1体而异,称为可变区,分别用VH和VL表示。两者构成*1体的*原结合部位,只与相应的*原决定簇匹配,发生特异性结合,是*1体专一性结合*原的结构基础。
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4. 请每次测定的同时做标准曲线,****1好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请****后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶1标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传1染物处理。
9. 本*不同批号组分不得混用。