武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种*1体、****学*盒、生化*、ELISA*盒、分子生物学*等多用途多属种的*产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、****学等生命科学领域。
1、染色过强 原因 解决办法 *1体的浓度过高或*1体孵育时间过长 降低*1体滴度(一般指浓缩性*1体)*1体孵育时间:室温1 小时或4℃过夜 孵育温度过高,孵育温度超过37℃ 一般室温20-28℃ DAB 显色时间过长或 DAB 浓度过高 显色时间不能超过5-10分钟,以显微镜下观察为准 2、非特异性背景染色 原因 解决办法 操作过程中冲洗不充分 每步冲洗3×5 *中含过氧化物酶未阻断 可再配置新鲜3%H2O2封闭,孵育时间延长 *中含内源性生物素 正常非****动物血1清再封闭 血1清蛋白封闭不充分 延长血1清蛋白封闭时间
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机体被微生物感1染后,先产生IgM*1体,然后产生IgG*1体。经过一段时间,IgM*1体量逐渐减少而消失,而IgG*1体可长期存在,在疾病痊愈后可持续数年之久。
IgM*1体一般为保护性*1体具有****性。因此IgM*1体的测定,对某些传1染病如甲型肝1炎有较高的临床诊断价值。右图为为甲型肝1炎病1人血1清中IgG*1体和IgM*1体出现的时间和水平。
1.3 *原*1体反应
1.3.1 可逆性
*原与*1体结合形成*原*1体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为:
Ag Ab→Ag·Ab
*1体的亲和力(affinity)是*原*1体间的固有结合力,可以用平衡常数K表示:
K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab]
Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力*1体的*原结合点与*原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的*原或*1体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法来提纯*原或*1体。在*血1清中,特异性的IgG*1体仅占总IgG中的****1小部分。用亲和层析法提取的特异性*1体,称为亲和层析纯*1体,应用于****测定中可得到更好的效果。
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1.3.4 敏*
在测定血1清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,elisa*盒代测,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,****测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿。标记的****测定的敏感度可****数千倍,达ng/ml水平。例如,用放1射****测定法或酶****测定法测定HBsAg,其敏感度可达0.1ng /ml。
1.4 ****测定在临床检验中的应用
由于各种*原成份,包括小分子的半*原,均可用以制备特异性的*血1清或单克1隆*1体,利用此*1体作为*就可检测标本中相应的*原,因此****测定的应用范围****广,在临床检验中可用于测定:
1) 体液中的各种蛋白质,包括含量****1少的蛋白质如甲胎蛋白等。