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应该注意的是，已被实验证实的固定二氧化碳反应，似乎并不发生在发酵的早期阶段：Kubicek等(1979b)报道，通过连续定量柠檬酸试验厂出口空气中二氧化碳和氧，观察到在发酵****初70小时呼吸系数(二氧化碳释放量／氧摄取量)接近于1；之后该系数开始降低并达到预期水平，柠檬酸厂家批发，即*酸羧化酶参与反应时的系数0．66，此阶段柠檬酸积累已经达到恒定速率(例如120小时之内)。因此，Cleland和Johnson发现的反应仅仅在发酵后期重要，而****初发生的柠檬酸积累没有二氧化碳补充供应。柠檬酸

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硅橡胶预聚物Sylgard 184与固化剂（Dow Corning，昆明柠檬酸，USA）；盖玻片规格为50 mm×24 mm，厚120 μm； NaOH、KH2PO4、KCl、NaCl、LiCl均为广州化学*厂产品，分析纯；罗丹明B为北京瀛海精细化工厂产品；三(羟甲基)氨基r*（Tris，上海化学*分装厂)，分析纯；所有*使用时均未进一步纯化；实验用水均为二次蒸馏水。所用缓冲液为0.1 mol/L Tris储备液稀释成相应的水溶液。所有溶液使用前超声除空气10 min，并用4.5 μm孔径虑膜过滤。

每次实验前，依次用0.1 mol/L NaOH、二次蒸馏水、缓冲液冲洗芯片通道各1 min。

方法为：分别在4个芯片储液池中注入冲洗液，然后依次用带吸嘴的真空管对其中一个储液池抽真空，引导溶液流过芯片通道，保证溶液充满整个通道。每次抽液时，其余每个储液池充满溶液，柠檬酸销*气进入通道。柠檬酸

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(四)冰淇淋和人造奶油

添加柠檬酸可以****冰淇淋和人造奶油的口味，增加乳化稳定性，****氧化作用。

(五)腌制品

各种肉类和蔬菜在腌制加工时，加入或涂上柠檬酸可以****风味、除腥去臭、*r氧化。

(六)罐头食品

罐头食品加入柠檬酸除了调酸作用之外，还有螯合金属离子的作用，柠檬酸供货商，保护其中的*坏血酸，使之不被金属离子*。柠檬酸添加到植物油中也有类似作用。

(七)豆制品及调味品

用含有柠檬酸的水浸渍大豆，可以脱腥并便于后续加工。柠檬酸可以用于大豆等豆类蛋白、葵花籽蛋白的水解，生产风味别致的调味品。它也可以用于成熟调味品(酱油等)的调味。二、柠檬酸发酵机理

黑曲霉可以发酵糖类、乙醇和醋酸产生柠檬酸，这是一个非常复杂的生化过程。早在上一世纪末，人们就开始对柠檬酸的发酵机理进行了探讨。一般理论认为柠檬酸是由EMP途径、*酸羧化和三羧酸循环而形成的。柠檬酸