石蜡包埋切片的HE染色法

分色后用自来水或加数滴氨水碱化，直至细胞核变成蓝色。这一步骤也可称为“蓝化”。

入蒸馏水洗去碱性水分。

入70%酒精→80%酒精各5分钟。

入伊红染液染色30秒至数分钟。

以95%酒精对伊红分色，至胞浆，结缔*等呈桃红色。

上行脱水：染色后的切片，因*内含水而不透明，不能清晰地观察其微细结构。因此，须将*内的水分经各级酒精→无水酒精逐步置换，****后进入不含水份的透明剂内。

透明：入*透明剂，二次（各数分钟）。

取出切片：将*周围多余的*擦去，滴树胶后加盖玻片封固。

结果：细胞核蓝紫色，胞浆、胶原纤维、肌纤维为桃红色，嗜酸性颗粒为鲜红色，弹性纤维呈明亮桃红色。

①新鲜恒冷箱冷冻切片，厚6~8μm，平贴在盖玻片上。

②滴染法：将有冷冻切片的盖玻片（标本面朝上）平放于预热好的培养皿中（底部垫一湿滤纸），滴加孵育液至全部覆盖*，于37℃温箱中孵育45~60分钟（肝，心肌*15分钟即可）。

③于生理盐水中冲洗二次（轻晃，以防脱片）。

④10%*生理盐水固定10分钟。

⑤15%酒精浸洗5分钟（换二次）。

⑥甘油明胶封片。

结果：酶活性强处呈蓝色颗粒（双甲沉淀），酶活性较低时形成紫红色单甲。在光镜下，该酶活性于肝小叶内分布呈明显分带现象，周边带强于*带。在心肌细胞纵切面，酶活性颗粒沿心肌细胞长轴整齐排列，相邻心肌细胞的空白处为闰盘。

冲洗：  材料自固定液中取出后，需立即冲洗，使其中所有的固定液全部除去，以妨碍染色 有些固定液，如10%*液、Bouin氏液固定的材料，若时间较短的话可不必冲洗。但时间过长亦需冲洗  3、脱水（37度恒温箱）  所谓脱水就是利用脱水剂将*内的水分置换出来，以利于*的渗入，这一过程称为脱水。  脱水是否*，直接关系到*是否能充分透明   脱水过度（原因是*在纯酒精内时间过久，发生*质地发生变化）容易造成*发脆。造成*发脆的原因还有加温（温度超过36℃）、脱水剂内加有*、浸蜡用的石蜡

中*过多等等。一般我们总认为*发脆跟高浓度酒精有关，而忽视了与低浓度的酒精关系，其实低浓度的酒精具有强大的穿透力，比纯酒精更容易渗透到*块内部使之脱水，*如果在低浓度酒精里充分脱水，在高浓度酒精里只需脱去从低浓度到高浓度之间的水份，因此，仅需短时间就可完成，如果这时不缩短纯酒精的时间，便会引起*发脆；如果脱水时加温，使用*，还可引起*收缩，并影响*****化学的标记.