制作方法
脱水:是将*细胞所含水分除去。通常用乙醇(Alcohol,酒精),浓度递升到 100%。此过程还使*块进一步硬化。
透明:是用既能溶于纯酒精又能融解石蜡的*,将*中的酒精取代,以便石蜡浸入。通常用*(xylene)为透明剂。
浸蜡:在温箱内进行。已透明的*块放入加热融解的石蜡中,让石蜡浸透*,作为支持介质。
包埋:将已浸蜡的*块放入热融的包埋石蜡中,迅速冷凝,*决便被蜡包埋。
切片:用切片机。常用的切片机有轮转式、平推式的。用轮转式的易于切出连续切片。切片厚度随制片目的而调整。教学标本厚度多是5~6μm。
贴片烤干:石蜡切片在温水上展平后,移在玻片上,烤干,即可供染色处理。染色后用树胶、盖坡片封固,可*保存。
显示标本结构成分的染色法
一*素伊红染色法(HE染色法)
为****常用的染色法。该法应用于各种*的染色,是*学技术的基本方法,对任何液体固定的*和各种包埋的切片均可使用,只是对不同包埋的切片法处理略有不同。下面简介石蜡包埋切片的HE染色法。
1、脱蜡:石蜡切片的*内部充满石蜡,不能使水溶性染液着色,因此在染色前必须首先用*将石蜡脱掉,共两次。
2、下行入水:将已脱蜡的标本浸入无水酒精及各级酒精,使*逐步接近水。3、蒸馏水略洗。
4、*素溶液染色约5—15分钟
5、自来水洗去多余染料。
6、入稀释的盐酸酒精溶液中分色,边分色边镜检,至核呈红紫色,细胞质无
色为合适。
石蜡包埋切片制作法
这是****常用的切片法。以石蜡作为*的填充支持介质,将整块*加以包埋,****后凝固成均匀一致的固态结构。用切片机制取****薄的切片。为了让石蜡能浸入*内部,需将*经过脱水等处理。过程大致如下:
⑴固定:生物标本脱离机体或培养环境,细胞会发生自溶,*分解。因此,需用固定剂处理,使蛋白质凝固停止濒死或死后变化。凡供*保存的标本都需经固定处理。
常用的固定剂是甲醛、乙醇等,能使蛋白质凝固。还有由几种*配成的固定液,例如Carnoy固定液,由无水酒精、****、冰醋酸配成,固定力更快更强,不含水分,可避免水溶性物质如糖原等在固定过程中损失。