新乡市求精教学仪器有限公司

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下列的各种切片方法基本上属于制作*玻片的各种切片方法。切片前会因应材料特性要作某些处理,切片后,便进入染色及制片的阶段。

徒手切片:意即仅用双手及刀片来切片的方法。若材料过小,可置于干燥的通草髓中,再徒手切片。

木材切片:木材由于质坚硬,不易进行切片,需要先裁取适当的大小(通常为0.5×0.5×4 厘米,适于切片机的大小)以煮沸法去除材料中的气体,再将材料软化(软化剂如甘油、*),软化后的材料再以切片机进行切片。

埋蜡切片:将材料埋于蜡块中,再连同蜡块一同切片,切片完再将材料里的石蜡去除的方法。



调整切片厚度调整器,以3-5um为宜,进行切片。切出的蜡片应连续成完整的带状,用毛笔轻轻将蜡片托起,而后用*镊夹起,正面向上放入水浴锅的温水中(水温一般低于蜡熔点10-12℃,在45-50℃左右),待切片展平后,即可进行分片和捞片。每次展片完后,必须认真清理水面,不得遗留*碎片,以防造成污染。

将蜡片捞起并附贴于涂有蛋白甘油的载玻片上,捞片时应注意蜡片位置(放在载玻片左或右2/3处*),要留出贴标签的空间,蜡片与载玻片之间应无气泡。捞起切片后,立即写上编号。

烤片:将已放置了蜡片的载玻片呈45o斜置片刻,待载玻片上的水分流下后插入切片架中,放入烤箱内烘烤,一般在60℃烤箱内烤30-60min,也可用烤片器烤片。经烘烤后,蜡熔化,切片牢固的贴于载玻片上。


下面从原理方面简要介绍几种常用的*化学染色技术:

1、显示琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的硝基-BT法:

(Succinate dehydrogenase)

⑴酶的*及生物学意义:

琥珀酸脱氢酶是线粒体标志酶,其存在于所有有氧呼吸的细胞,和线粒体内膜紧密结合。该酶不需辅酶而自身有黄素蛋白(FP,Fl*oprotein)为辅基。在组化反应中常用来反映三羧酸循环的情况。

⑵原理:上述的反应****后一步的原理是,硝基-BT(Nitro-blue tetrozolyum,四唑氮蓝)系异环族化合物四唑盐,当它接受氢时,本身被还原为有色沉淀产物(甲)(Formazan)。


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