武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种*1体、*学*盒、生化*、ELISA*盒、分子生物学*等多用途多属种的*产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、*学等生命科学领域。

1、染色过强 原因 解决办法 *1体的浓度过高或*1体孵育时间过长 降低*1体滴度（一般指浓缩性*1体）*1体孵育时间：室温1 小时或4℃过夜 孵育温度过高，孵育温度超过37℃ 一般室温20-28℃ DAB 显色时间过长或 DAB 浓度过高 显色时间不能超过5-10分钟，以显微镜下观察为准 2、非特异性背景染色 原因 解决办法 操作过程中冲洗不充分 每步冲洗3×5 *中含过氧化物酶未阻断 可再配置新鲜3%H2O2封闭，孵育时间延长 *中含内源性生物素 正常非*动物血1清再封闭 血1清蛋白封闭不充分 延长血1清蛋白封闭时间

武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种*1体、*学*盒、生化*、ELISA*盒、分子生物学*等多用途多属种的*产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、*学等生命科学领域。

3、染色弱 原因 解决办法 *1体浓度过低，孵育时间过短 提高*1体浓度，孵育时间不能少于60分钟 *超过有效使用期 及时更换* 操作中，滴加*时缓冲液未沥干，致 使*稀释 每步滴加*前沥干切片中多余的缓冲液（但防止切片干燥） 室温太低，低于15℃ 若室温低于15度，要改放在37℃孵育箱孵育30-60分钟（或4℃冰 箱过夜） 蛋白封闭过度 封闭时间不要超过10分钟 4、染色阴性 原因 解决办法 操作步骤错误 重新试验，设立阳性对照 *中无*原 设立阳性对照片，以验证实验结果 一*与二*种属连接错误 仔细确定一*与二*种属无误

武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种*1体、*学*盒、生化*、ELISA*盒、分子生物学*等多用途多属种的*产品，ADV ELISA*盒，服务涉及分子生物学、细胞生物学、*学等生命科学领域。

1.2.1　*1体的结构

*1体是能与*原特异性结合的*球蛋白(immunoglobulin，Ig)。Ig分五类，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与*测定有关的Ig主要为 IgG和IgM。Ig由两个轻链（L）和两个重链（H）的单体组成。Ig的轻链是相同的，有κ（kappa）和λ（Lambda）两种型别。五类Ig的重链结构不同，这决定了它们的*原性也不同。IgG和IgM的重链分别称为γ（gamma）链和μ（mu ）链。

重链和轻链的 N端的氨基酸排列顺序因各种*1体而异，称为可变区，分别用VH和VL表示。两者构成*1体的*原结合部位，只与相应的*原决定簇匹配，发生特异性结合，是*1体专一性结合*原的结构基础。