单*腹0水制备用佐剂

货号规格KX0210048-1010mlKX0210048-500500ml 将佐剂注射BALB/C小鼠腹腔，每只0.3-0.5ml处理腹腔15天左右（一般12-18天），然后注射杂交瘤细胞，建议每只注射80万-100万个。腹0水会比普通佐剂晚出1.5天-2天，但通常情况下腹0水的量是普通佐剂出量的1.5-2倍，且单*腹0水效价不变。

动物免0疫

使用 quickantibody 作为免0疫佐剂，对小鼠腿部肌肉注射免0疫，MRJ 重组蛋白( 1 μg /mL) 与免0疫佐剂各200 μL 混匀免0疫 6-8 周龄 BALB / c 小鼠 4 只，弗氏完全佐剂，每只注射 100 μL。初次免0疫后第 21 天同样的方法进行第二次免0疫，第 35 天尾静脉取少量血做效价检测，间接 ELISA 检测效价滴度高于 1 ∶ 8 000 则进行冲击免0疫，冲击免0疫直接以不加佐剂的 MRJ 蛋白对小鼠冲击免0疫一次，每只 20 μg。冲击免0疫后 96 h 内取脾0脏细胞做细胞融合。

材料与方法

一、材料

AFP购自上海领潮公司。SP2／0骨0髓瘤细胞(中科院上海细胞库)。8～12周龄Balb／c小鼠(第四军0医大学实验动物中心)。SPF级。

二、方法

1．动物免0疫：将4只8～12周龄Balb／c小鼠随机分为两组，每组2只，分别命名为1号和2号(第yi组)、3号和4号(第二组)。第yi组按常规免0疫方法进行免0疫一…，第二组采用改良的免0疫方法进行免0疫。免0疫前静脉采集少量血液，析出血0清作为后续检测的阴性对照血0清。

第yi组：AFP50ug(50肚1)与等量福氏完全佐剂(Sigma，美国)混合，充分乳化后注入8～12周龄Balb／c小鼠腹腔，2周后用同量*原加不完全福氏佐剂(Sigma，美国)腹腔注射，4周后用同量*原加不完全福氏佐剂腹腔注射，融合前3 d作腹腔注射加强免0疫。