产品描述:
使用动物血0清常会遭遇许多问题,例如:病毒感0染、或是其他动物源的污染原。使用无血0清制品培养与冻存细胞,可以消除这方面的隐患。此外,无血0清培养基可以确保细胞在化学成分固定的条件下生长,更进一步确保细胞冻存时的条件稳定。
Biological Industries(BI)开发无血0清细胞冻存液,细胞冻存与复苏后,平均活细0胞回收比例超过80%。与含血0清冻存液比较,BI无血0清冻存液细胞存活率都有较佳的表,BI无血0清细胞冻存液也适用于动物血0清培养的细胞冻存。
原位复苏方式:
1、从冰箱取出冻存培养板,立即放入37℃水浴槽中快速解冻。
2、待冻存的细胞悬液完全融化后,轻轻吸去细胞冻存液,QuickFreezing-2×M,按照常规换液操作加入新鲜培养基继续进行培养。
细胞冷冻保存方法
冻存管冻存方式:
1、按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。
2、按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。(参考:5×105至5×106cell*l)。
3、取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量,置于离心管中,离心收集培养细胞(参考离心条件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min)。移去离心管中的上清液。
4、加入适量无血0清细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度为5×105至5×106 cell*l。缓慢混合均匀,制成细胞混合液。
5、将离心管中的细胞混合液分装于已标示的冷冻保存管中建议每管1ml或1.5ml。。
6、直接将含细胞悬液的冻存管放入-80℃冰箱,冷冻保存。
冻存细胞复苏步骤
1. 从冰箱中取出冻存的细胞,立即放入37℃水浴槽中快速解冻。
2. 待冻存管中细胞混合液完全融化后,将其中的混合液移至离心管中,1000rmp,5分钟离心收集冻存细胞沉淀,移去上清液(操作时 小心,切勿将细胞沉淀移去)。
3. 加入适量的新鲜细胞培养基,使用移液管缓缓加入到细胞沉淀,轻柔地混匀,将细胞混合液移至事先准备好的培养容器中。
4. 镜检细胞后,可根据各自研究的需要和方法经行细胞常规培养。