*液相色谱的历史
1903年俄国植物化学家茨维特(Tswett)初次提出“色谱法”(Chromatography)和“色谱图”(Chromatogram)的概念。茨维特使用色谱法 chromatography (来自希腊字, chroma 意思是颜色, graphy 意思是记录 - 直译为颜色记录)来描述他的彩色试验。(令人好奇的是, 俄罗斯名字茨维特意思是颜色。)1930年以后,相继出现了纸色谱、离子交换色谱和薄层色谱等液相色谱技术。1952年,英国学者Martin和Synge 基于他们在分配色谱方面的研究工作,*液相色谱,提出了关于气-液分配色谱的比较完整的理论和方法,把色谱技术向前推进了一大步,这是气相色谱在此后的十多年间发展十分迅速的原因。1958年,基于Moore和Stein的工作,离子交换色谱的仪器化导致了氨基酸分析仪的出现,这是近代液相色谱的一个重要尝试,但分离效率尚不理想。1960年中后期,气相色谱理论和实践发展,以及机械、光学、电子等技术上的进步,液相色谱又开始活跃。到60年代末期把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱就出现了HPLC。1970年中期以后,微处理机技术用于液相色谱,进一步提高了仪器的自动化水平和分析精度。1990年以后,生物工程和生命科学在国际和国内的迅速发展,为*液相色谱技术提出了更多、更新的分离、纯化、制备的课题,如人类*组计划,蛋白质组学有HPLC作预分离等。
*液相色谱仪器的安装对环境的要求
1、电源电压要求220V
有条件的情况下尽量使用照明电,此电压比较稳定,对仪器的性能稳定性较好,在没有办法的时候,必须要用动力线路供电时,就要采取相应的办法克服或减少由于电机频繁启动,停止运行时对电网电压波动的影响。电机是*负载,停止和启动能产生很强的干扰尖脉冲电压。如请电工师傅单独从动力变压器零线以及负载较轻一些的火线上单独引线至实验室,这样可以大大减少对仪器的干扰,在经济上允许时,尽量使用交流稳压器。总之,电压低不能超过198V,*液相色谱多少钱,高不超过230V为好。
2、对实验室的要求
a. 室内尽量有防尘设施,仪器工作时产生大量的热量,通过仪器的风扇散热,这样就有可能将周围的灰尘带入机内,在静电的作用下,附于电路上,时间长了,*液相色谱哪家好,特别是南方,多雨季节比较潮湿,有可能给仪器工作造成不良的影响。
b. 对实验室温度的要求是温度变化相对要很小。特别是太阳光线不要直射于仪器上,否则仪器将会出现不稳定的情况。如流动相内可能产生肉眼看不到的气泡,进入系统内时,基线稳定性变差。柱子温度变化,会使保留时间有所变化,对分析的结果有一定的影响。紫外检测器的稳定时间以及工作中的稳定性都与环境温度的恒定有很大的关系。有条件时,*液相色谱费用,尽量安装空调。注意,空调机供电不要与仪器供电用同一个线路。
c. 地线,消除干扰。提高仪器稳定性,保证人身安全。
*液相色谱仪-色谱峰的双峰问题
长期使用后的色谱柱,如果有杂质进入,就会使色谱柱入口处的固定相“板结”并在流动相所产生的高压作用下,形成柱头的塌陷,被分析的样品组分的正常色谱峰就变成了双峰,这时可按下述方法来*色谱柱。首先将柱头的紧固螺母旋下,这时就会发现柱头内的固定相已被压缩进去了,严重时可缩进10mm以上。在这种情况下,我们可用针尖将流动相表层板结变黄的部分抠掉,并以相同的固定相将此塌陷区填平、压实,再将色谱柱的紧固螺丝上紧,*工作即告结束。用经过*后的色谱柱再做样品时,色谱峰就恢复正常了。