HPLC分析流程图

现代HPLC一般都做成一个个单元组件，然后根据分析要求将各所需单元组件组合起来。

基本的组件是高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器和数据系统(目前基本上为色谱工作站，记录仪和积分仪已很少见)。

此外，还可根据需要配置流动相在线脱气装置、梯度洗脱装置、自动进样系统、柱后衍生系统、样品收集系统和全自动控制系统等。

HPLC的工作过程：输液泵将流动相以稳定的流速(或压力)输送至分析体系，在色谱柱之前通过进样器将样品导入，*液相色谱多少钱，流动相将样品带入色谱柱，在色谱柱中各组分因在固定相中的分配系数或吸附力大小的不同而被分离，并依次随流动相流至检测器，检测到的信号送至数据系统记录、处理以及保存。

HPLC对流动相的一般要求

流动相就比如*的血液，其质量直接影响到整个系统的正常运行与否。

copy; 应该使用HPLC级的溶剂，不能互相混溶的溶剂不可以直接切换！

copy; 注意溶剂的截止波长。截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的很低波长，低于该波长后，溶剂会有很强的紫外吸收，从而影响*限的稳定性、干扰对所分析物质的检测。

copy; HPLC所使用的水必须是新鲜的和经过0.45μm滤膜过滤过的。建议每天更换新鲜的水。长期不用时，必须把使用水的管路用有机的溶剂置换，防止长霉。

copy; 仪器使用完后要采用适当的溶剂冲洗等方法维护色谱柱和系统。如果使用了缓冲盐一定先将盐要冲洗干净。

copy; 当有流路堵塞时，可以尝试将之反接后冲洗。污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命，河北*液相色谱，并且影响泵和系统的的性能。这在水溶剂或*盐缓冲液(pH 4 至7) 中尤其如此。

液相色谱理论发展简况

色谱法的分离原理是:溶于流动相 (mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase) 发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同，*液相色谱报价，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。 色谱法很早是由植物学家茨维特(Tswett)在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，Tswett用希腊语chroma(色)和graphos(谱)描述他的实验，色谱法(Chromatography)因之得名。后来在此基础上发展出纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法。液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相色谱法，此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。