HPLC对流动相的一般要求
流动相就比如*的血液,其质量直接影响到整个系统的正常运行与否。
copy; 应该使用HPLC级的溶剂,不能互相混溶的溶剂不可以直接切换!
copy; 注意溶剂的截止波长。截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的很低波长,低于该波长后,*液相色谱哪家好,溶剂会有很强的紫外吸收,从而影响*限的稳定性、干扰对所分析物质的检测。
copy; HPLC所使用的水必须是新鲜的和经过0.45μm滤膜过滤过的。建议每天更换新鲜的水。长期不用时,必须把使用水的管路用有机的溶剂置换,防止长霉。
copy; 仪器使用完后要采用适当的溶剂冲洗等方法维护色谱柱和系统。如果使用了缓冲盐一定先将盐要冲洗干净。
copy; 当有流路堵塞时,可以尝试将之反接后冲洗。污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命,并且影响泵和系统的的性能。这在水溶剂或*盐缓冲液(pH 4 至7) 中尤其如此。
关于色谱柱的使用和维护
色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。
调节流速太快。。。
避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓(如前所述)。
反冲色谱柱。。。
一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
预柱和保护柱。。。
选择使用适宜的流动相(尤其是pH),*液相色谱报价,以避免固定相被*。有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,北京*液相色谱,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。
色谱柱的安装
(1)拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。
(2)拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。
(3)按柱管上标示的流动相流向,将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如,*液相色谱哪家效果好,条件允许,建议在柱前使用保护柱);柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57 mm、内径为0.1~0.3 mm的不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封用压环。在接管时一定要设法降低柱外死体积。连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底,然后顺时针拧紧空心螺钉,直到拧不动为止。