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高压液相色谱

这是指柱压一般大于20bar(或300psi)的“高压(或*)液相色谱”,通常指所用色谱柱的塔板数大于2000,一般是在2000~20000的范围之间。

当需要从大量的物质中分离纯化不足1%的所需成分时,分离工作将会十分困难,往往在纯化的后面阶段需要使用10μm或更小颗粒的*填料。为获得所需微量组分,可采用如下分离手段:制备型分离→半制备型分离→分析型分离→产物。为提高每次分离获得纯品的数量,*液相色谱哪家,制备型高压液相色谱分离通常在超载情况下运行。

高压液相色谱,*液相色谱价格,即目前常用的*液相色谱。色谱柱内填装的是粒度范围较窄的微小颗粒固定相(3~30μm),为使流动相流出,需采用较高的压力,同时系统的复杂性及成本亦*,河北*液相色谱,但分辨率可得到较大的提高。而填装较大颗粒的固定相时,如中压液相色谱系统,装柱较容易,柱的通透性较高(只需较低的泵压力),可采用更大的色谱柱和更经济的仪器,由此分辨率也较低。




*液相色谱仪

*液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。

1.进样系统

一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作进样量是恒定的。

2.输液系统

该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。

3.分离系统

该系统包括:色谱柱、连接管和恒温器等。

4.检测系统

*液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种

5.数据处理系统

该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作,使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。




*液相色谱的历史

1903年俄国植物化学家茨维特(Tswett)初次提出“色谱法”(Chromatography)和“色谱图”(Chromatogram)的概念。茨维特使用色谱法 chromatography (来自希腊字, chroma 意思是颜色, graphy 意思是记录 - 直译为颜色记录)来描述他的彩色试验。(令人好奇的是, 俄罗斯名字茨维特意思是颜色。)1930年以后,相继出现了纸色谱、离子交换色谱和薄层色谱等液相色谱技术。1952年,*液相色谱方法,英国学者Martin和Synge 基于他们在分配色谱方面的研究工作,提出了关于气-液分配色谱的比较完整的理论和方法,把色谱技术向前推进了一大步,这是气相色谱在此后的十多年间发展十分迅速的原因。1958年,基于Moore和Stein的工作,离子交换色谱的仪器化导致了氨基酸分析仪的出现,这是近代液相色谱的一个重要尝试,但分离效率尚不理想。1960年中后期,气相色谱理论和实践发展,以及机械、光学、电子等技术上的进步,液相色谱又开始活跃。到60年代末期把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱就出现了HPLC。1970年中期以后,微处理机技术用于液相色谱,进一步提高了仪器的自动化水平和分析精度。1990年以后,生物工程和生命科学在国际和国内的迅速发展,为*液相色谱技术提出了更多、更新的分离、纯化、制备的课题,如人类*组计划,蛋白质组学有HPLC作预分离等。



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