低温生物*的孢子分离法

( 1 )褶上涂抹法:选取新鲜、健壮、未开伞、的子实体，洗净后用0 75 %酒精表面灭菌2 分钟，然后连同培养基一起放入接种箱内，经马林熏蒸消毒12 ~ 24 小时，再按无菌操作技术将接种环在子实体菌褶上涂抹，低温生物*多少钱，把涂抹后带孢子的接种环在培养基上划线接种，然后置于25 ~ 28 ℃恒温箱内培养，可得纯*。

( 2 )孢子印采集法:取灭过菌的载玻片、试纸或黑布，置于新鲜、未开伞或未开裂的子体菌褶的下方。经24 小时后，便落下孢子，形成印痕(即孢子印)。然后，用接种环或玻璃棒蘸取孢子，接种在平面或斜面培养基上，进行恒温培养，可得纯*。

( 3 )孢子收集器采集法:孢子收集器由玻璃钟罩、培养皿、三角架、搪瓷盘等组成。钟罩下为一搪瓷盘，直径25 厘米左右，盘内先垫衬4~6 层纱布，*放1 副9 厘米直径的培养皿，大盖口朝下，上放小的，口向上。然后，在上面小的培养皿上放1 只铅丝绕成的三角架，再将带孔的玻璃钟罩盖上，顶上罩孔用棉塞塞好，用纱布包好整个孢子收集器，置于高压灭菌锅或蒸笼内灭菌2小时。

低温生物*的防护方法有哪些？

主要的方法是：①用添加剂和速冻，以防止冰晶的形成，即使形成，低温生物*，也是微小的冰晶，不致引起机械损伤。常用的添加剂是甘油和某些多元醇类化合物如甘醇等，其作用是使水不易结冰。速冻是将生物体在很短时间内，立即降至液态氮的温度（约为-195℃），使水迅速凝固，以避免形成冰晶。只用添加剂不能完全防止结冰；单靠速冻虽能避免在降温时形成较大的冰晶，却不能避免在温度回升时形成较大冰晶。只有两者适当结合，才能避免低温对生物体的损伤；②冷冻干燥，即在凝固状态下，依靠真空干燥使水分升华，以防止因速冷而凝固的液体在温度回升时又形成冰晶。生物样品经冷冻干燥后在常温下即可储存，是一种较为理想的保存方法。但这种方法在温度过低时， 升华过慢， 温度偏高时又很难避免冰晶的形成，低温生物*哪家好，而且完全脱水也会给复杂的生物体带来某些不可恢复的损伤。因此只用于保存生物制品乳品、食品，以及*和病毒(见*保藏)等。

低温生物*的保存方法有哪些？

（一）培养基保存法

利用各种斜面和半固体培养基，加上石蜡油保存*，是一种简易的保存方法。

1.普通琼脂斜面保存法：肠道菌、等一般*可接种于不含糖的普通琼脂斜面上，斜面底部应加少许无糖肉膏汤，以防干涸。经35℃培养18～24h后，移种于4℃冰箱中，一般可保存一个月，每月传代一次。

2.血液琼脂斜面保存法：链球菌、应接种于血液琼脂斜面上，35℃培养生长后，置4℃冰箱中保存，链球菌须半个月至1个月移种一次，新分离菌株须2～4天移种一次，以后逐渐延长移种时间，在适应后可延至半个月移种一次。

3.巧克力色斜面保存法：宜保存菌，并在35℃孵箱中保存，一般每2天移种一次。

4.鸡蛋斜面保存法：适于保存含有Vi*原的沙门菌属及其他含表面*原的*，一般可保存一个月。

5.半固体穿刺保存法：将*接种于琼脂半固体或琼脂半固体内，经35℃培养18～24h，低温生物*报价，再以无菌方法加入灭菌的液体石蜡。高度约lcm，置4℃冰箱保存。保存时间可达3～6个月。

（二）干燥保存法

原理是将*体内的水分蒸发掉，使其处于休眠和代谢停滞状态，从而达到长期保存*的目的医|学教|育网搜集整理。*干燥后低温保存，可保存数年至十几年。

（三）冷冻干燥保存法

本法又称冷冻真空干燥法。它综合利用了各种有利于*保存的因素（低温、干燥和缺氧等），是目前有效的*保存方法之一。用本法保存的*具有成活率高，变异性小等优点，保存期一般3～5年，有的可长达10年以上。

（四）脱脂牛奶保存法

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