这些*Arf 6-GTP单克l隆*l体还可用于通过免l疫组织化学监测细胞和组织中Arf 6的激l活。

NewEast Biosciences Arf6激l活测定*盒提供了一种简单且快速的方法来监测Arf 6的激l活。每个*盒均提供足够的量以执行20个测定。

NewEast Biosciences Arf 6激l活检测*盒基于特定于配置的*Arf 6-GTP单克l隆*l体，可从细胞提取物或体外载有GTPγS的Arf 6激l活检测方法来测量活性Arf 6-GTP水平。 简而言之，*活性的Arf 6小鼠单克l隆*l体将与含有Arf 6-GTP的细胞裂解液一起孵育。 然后，结合的活性Arf 6将被蛋白A / G琼脂糖拉低。 分别使用*Arf 6兔多克l隆*l体通过免l疫印迹分析检测沉淀的活性Arf 6。

检测原理

武汉纽斯特生物技术有限公司的Cd*2活性检测*盒主要是利用识别蛋白特异形态的Cd*2-GTP单克l隆*l体特异性的去检测细胞提取物或者体外的（样品需要进行GTPγS活化处理）活性Cd*2-GTP的水平。简言之，特异性识别Cd*2活化构象的鼠单克l隆*l体可以特异性结合细胞裂解液中的Cd*2-GTP活性蛋白，然后利用protein A/G将*原*l体的结合物吸附下来，再利用特异性识别Cd*2活化构象的兔多克l隆*l体进行免l疫印迹分析进行检测。

检测步骤

Ι。活性Cd*2 Pull-Down实验

1. 等分0.5-1 mL的细胞裂解物至微量离心管中。

2. 向管中加入1mL的1X Assay/Lysis 缓冲液。

3. 向管中加入1ul的活性Cd*2单克l隆*l体。

4. 用涡旋振荡仪将protein A/G凝胶柱充分混匀，然后快速的吸出20ul悬浮珠浆液加入离心管中。

5. 将管置于4°C条件下孵育1H，并轻轻的进行摇动。

6. 5000g，离心1分钟。

7. 弃上清，这一步要非常小心以避免珠子的损失。

8. 用0.5 mL的1X Assay/Lysis缓冲液洗涤珠子三次，重组人Gs蛋白，离心并弃去上清。

9. 后一次洗涤后，小心的移去所有的上清。

10. 用20ul的2X SDS-PAGE样品缓冲液重悬样品。

11. 样品煮沸5min。

12. 5000g，离心10s。