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色谱分析法、层析法,是一种分离和分析方法,现代生物企业生产过程中的核心技术之一。在分析化学、有机化学、生*学等领域有着非常广泛的应用。色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,终达到分离的效果。色谱理论:保留时间保留时间是样品从进入色谱柱到流出色谱柱所需要的时间,不同的物质在不同的色谱柱上以不同的流动相洗脱会有不同的保留时间,因此保留时间是色谱分析法比较重要的参数之一。保留时间由物质在色谱中的分配系数决定:tR = t0(1 KVs / Vm)式中tR表示某物质的保留时间,t0是色谱系统的死时间,即流动相进入色谱柱到流出色谱柱的时间,这个时间由色谱柱的孔隙、流动相的流速等因素决定。K为分配系数,VsVm表示固定相和流动相的体积。这个公式又叫做色谱过程方程,是色谱学基本的公式之一。



制备液相色谱仪是一种由储液瓶、高压泵、进样系统、色谱柱、检测器、废液瓶六部分组成的仪器。

制备液相色谱基础知识一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是:溶于流动相( phase)中的各组分经过固定相时,高压制备,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。

色谱法早是由俄国植物学家茨维特(Tswett)在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的,色谱法(Chromatography)因之得名。后来在此基础上发展出纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法。





液相色谱仪流动相性质: 1、底剂决定基本的色谱分离,洗脱剂对某几个组分选择分离。流动相组成改变,*性改变,可显著改变组分分离状况。 2、亲水性固定液常采用疏水性流动相,即流动相的*性小于固定相的*性,称为正相液液色谱,*性柱称正相柱,正相柱的底剂用低*性溶剂,洗脱剂用*性较强的溶剂。 3、若流动相的*性大于固定液的*性,称为反相液液色谱。非*性柱称为反相柱,反相柱常以水为流动相的主体,再加入不同配比的有机溶1剂做调节剂。



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