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武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、*、细胞等生物实验。





采用根*农介导的方法,以受控于CaMV35S启动子的携带有GFP报告*的双元植物表达载体pCAMBIA1300-35S-GFP转化洋葱表皮细胞.荧光显微镜下观察结果显示,GFP*在经浸染和共培养后的洋葱表皮细胞中得到了表达,绿色荧光分布在细胞核和细胞质中,为进一步研究新*的亚细胞*和瞬时表达奠定了基础.

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本研究旨在通过对根*农侵染洋葱表皮细胞的条件进行优化,从而建立一种新的瞬时表达系统,并将其应用于玉米In5-2启动子的功能区域的分析中,洋葱亚细胞*找哪里,明确In5-2启动子的乙酰类化合物诱导元件的具体位置。在本研究中采用根*农(A grobacterium tume faciens)侵染洋葱(Allium cepa)表皮细胞,对转β-葡糖醛酸酶(GUS)*的瞬时表达进行研究,并分析了侵染液中乙酰丁香酮(As)的浓度、侵染时间、菌液浓度、共培养时间对GUS*的瞬间表达的影响。结果显示,在OD600值为0.8的农液中15min,共培养3d,能够得到较高的GUS*瞬间表达,从而建立了一种新的瞬间表达系统。同时,构建了含不同长度的玉米(Zeamays)In5-2启动子片段缺失载体,利用新的瞬时表达系统分析其功能区域,推测出乙酰类化合物诱导元件位于ATG上游-220~-143bp之间。结果表明新的瞬时表达系统可以快速有效地进行启动子的分析。

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目的研究1个白木香倍半萜合酶(ASS)的亚细胞*,确定其功能区域,并比较3种瞬时表达体系在亚细胞*研究中的优劣。方法从白木香愈伤*中提取总RNA,采用特异引物RT-PCR方法倍半萜合酶ASS*,并连接于pEZS-NL载体和pFGC5941GFP改造载体上,分别构建pFGC5941-GFP-ASS、pEZS-NL-ASS-GFP 2种植物表达载体,分别利用根*农侵染叶片、*枪轰击洋葱表皮细胞、PEG转化白木香原生质体3种技术进行瞬时转化表达,激光共聚焦显微镜下观察表达出的绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的亚细胞*。结果在叶片表皮细胞、洋葱表皮细胞及白木香原生质体中,融合蛋白绿色荧光均能被观察到。ASS*与GFP的融合蛋白产物在叶片中*于胞质,在洋葱表皮中*于胞质和细胞核,白木香原生质体中*于胞质和质体。结论 ASS*在白木香原生质体胞质及质体*;对3种体系的结果比较表明,应用不同体系研究蛋白的亚细胞*可能出现不同的结果,这可能与同源或异源表达的植物细胞的特性有关。

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