阴性对照用已知不存在相应靶序列的*标本杂交,结果应为阴性。阴性对照可排除在杂交过程中由于非特异性杂交反应等因素造成的假阳性结果。
阳性对照用已知含靶序列的*切片与待检标本同样处理,结果应为阳性,称阳性对照。通过阳性对照可证明杂交过程中各个步骤以及所使用的*都合乎标准,实验方法可靠。尤其当待检标本为阴性时,阳性对照片呈阳性反应可排除待检标本假阴性的可能。故若预期杂交结果为阴性时,就必须设阳性对照,当阳性对照亦不显色,就证明杂交过程的某一步骤或所用*问题。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、*、细胞等生物实验。
原位杂交天1. 重新水化和固定1) 吸取固定好的胚胎,加入50%的PBST溶液,放置5分钟。2) 置换成30%的PBST溶液,放置5分钟3) 置换成PBST溶液,放置5分钟,重复一次4) 置换成4%*的PBS溶液固定20分钟5) 用PBST洗两次,每次放置五分钟,室温。用10ul/ml的蛋白酶K在室温下处理胚胎。5体节以下的胚胎不处理,5体节到24小时的胚胎处理3分钟,24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。发育时间越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶处理,发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松*,以便于杂交。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、*、细胞等生物实验。
原位杂交技术的基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列,原位杂交,将有性或非性的外源核酸(即探针)与*、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在*、细胞或染色体上的位置显示出来。