武汉默沙克生物科技有限公司

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武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种*1体、*学*盒、生化*、ELISA*盒、分子生物学*等多用途多属种的*产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、*学等生命科学领域。




6.酶*测定

酶*测定(enzymeimmunoassay)可分为均相(homogenous)和非均相(heterogenous)两种类型。在均相E0IA中可不需进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下,*原*1体反应后形成的酶标记*原*1体复合物中的酶失去其对底物作用的活力,因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相E0IA在临床检验中较少应用。非均相E0IA需*行游离的和结合的标记物的分离。如前所述,固相载体可用作一种分离手段。这种固相酶*测定方法在1971年1初建立时称为酶联*吸附剂测定(enzymelinked immunosorbent assay),简称ELISA,在国内有译作酶联*吸附试验的,虽然含义不完全确切,但已习用。



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1.3.2 适比例

在恒定量的*1体中加入递增量的*原形成*1体复合物(沉淀)的量见图1-4。曲线的高峰部分是*原*1体比例合适的范围,称为等价带(zone ofequivalence)。在等价带前后分别为*1体过剩带和*原过剩带。如果*原或*1体*度过剩,则无沉淀物形成,在*测定中称为带现象(zone phenomenon)。*1体过量称为前带(prezone),*原地过量称为后带(p1ostzone)。在用*学方法测定*原时,应使反应系统中有足够的*1体量,否则测得的量会小于实际含量,甚至出现假阴性。



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机体被微生物感1染后,先产生IgM*1体,然后产生IgG*1体。经过一段时间,IgM*1体量逐渐减少而消失,而IgG*1体可长期存在,在疾病痊愈后可持续数年之久。

IgM*1体一般为保护性*1体具有*性。因此IgM*1体的测定,对某些传1染病如甲型肝1炎有较高的临床诊断价值。右图为为甲型肝1炎病1人血1清中IgG*1体和IgM*1体出现的时间和水平。

1.3 *原*1体反应

1.3.1 可逆性

*原与*1体结合形成*原*1体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为:

Ag Ab→Ag·Ab

*1体的亲和力(affinity)是*原*1体间的固有结合力,可以用平衡常数K表示:

K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab]

Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力*1体的*原结合点与*原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的*原或*1体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法来提纯*原或*1体。在*血1清中,特异性的IgG*1体仅占总IgG中的*1小部分。用亲和层析法提取的特异性*1体,称为亲和层析纯*1体,应用于*测定中可得到更好的效果。



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