武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种*1体、*学*盒、生化*、ELISA*盒、分子生物学*等多用途多属种的*产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、*学等生命科学领域。

6．酶*测定

酶*测定（enzymeimmunoassay）可分为均相（homogenous）和非均相（heterogenous）两种类型。在均相E0IA中可不需进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下，*原*1体反应后形成的酶标记*原*1体复合物中的酶失去其对底物作用的活力，因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相E0IA在临床检验中较少应用。非均相E0IA需*行游离的和结合的标记物的分离。如前所述，固相载体可用作一种分离手段。这种固相酶*测定方法在1971年*1初建立时称为酶联*吸附剂测定（enzymelinked immunosorbent assay），简称ELISA，在国内有译作酶联*吸附试验的，虽然含义不完全确切，但已习用。

武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种*1体、*学*盒、生化*、ELISA*盒、分子生物学*等多用途多属种的*产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、*学等生命科学领域。

2) 激1素，包括小分子量的甾体激1素等。

3) *生1素和药1物。

4) 病原体*原，HBsAg、HBeAg等。

5) 另外，也可利用纯化的*原检测标本中的*1体，例如*-HBs等。

5．标记的*测定

如上所述，*测定是一种很敏感的测定方法，*原*1体反应后直接测定形成的沉淀或浊度，敏感度可达5~10μg/ml，但在临床检验中，某些待测物在标本中的含量远低于这一水平，因此要寻找增加敏感度的方法。标记的*测定是将检测*中的*原或*1体用可微量测定的物质加以标记，通过测定标记物来提高敏感度。在放1射*测定和酶*测定中，标记物分别为放1射性核素和酶，*后用测定放1射性和酶活力来计算待检物的量，敏感度可比直接测定沉淀物提高数百至数千倍。在标记*测定中，一般加入过量的标记*以保证与待测物*反应。以标记*1体（Ab ※）检测*原（Ag）为例，IgA ELISA*盒，反应式如下：

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ELISA*盒操作步骤

1. 加样：标准品设定5个浓度点10个孔，每个浓度设定平行孔，加入50微升不同浓度的标准品，空白孔设定1个孔加入50微升蒸馏水（空白对照孔不加样品及酶标*，其余各步操作相同）、待测样品孔，在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。