武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种*1体、免1疫学*盒、生化*、ELISA*盒、分子生物学*等多用途多属种的*产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、免1疫学等生命科学领域。

1. 在无*1生素的培养基中消化、计数和稀释细胞，稀释到常规细胞传代的浓度。

2. 分散细胞悬液到多孔培养板中，或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内，把选择*1生素加入到每一个孔中。例如，两1性霉1素B推荐下列浓度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0，8.0 mg/ml。

3. 每天观测细胞毒性指标，如脱落，出现空泡，汇合度下降和变圆。

4. 确定*1生素毒性水平后，使用低于毒性浓度2～3倍浓度的*1生素的培养液培养细胞2～3代。

武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种*1体、**学*盒、生化*、ELISA*盒、分子生物学*等多用途多属种的*产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、**学等生命科学领域。

ELISA*盒操作步骤

1. 加样：标准品设定5个浓度点10个孔，每个浓度设定平行孔，加入50微升不同浓度的标准品，空白孔设定1个孔加入50微升蒸馏水（空白对照孔不加样品及酶标*，其余各步操作相同）、待测样品孔，在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，elisa，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种*1体、**学*盒、生化*、ELISA*盒、分子生物学*等多用途多属种的*产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、**学等生命科学领域。

4） 吸取匀浆液到离心管，4℃ 5000×g 离心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

6、 尿液、唾液等其他液体生物样本

1000×g离心20min，取上清即可检测。

总的来说，因为ELISA只能检测可溶性蛋白的含量，所以应保证所有样本均为澄清的液体，沉淀或悬浮物都应离心去除。

为了保证检测的准确性，保存于-20℃或-80℃的样本*1好在1~6个月内检测；4℃保存的样本应在1周内进行检测。

另外，还应保证样本不含NaN3，因为NaN3会*HRP的活性，从而导致假阴性的结果。