（1）戊二1醛二步法) M ~0 L l# k! D

1） 原理：戊二1醛为一种双功能*，通过其醛基分别与酶和****球蛋白上的氨基共价结合，形成酶-戊二1醛-****球蛋白结合物。6 C，鱼ELISA*盒， Q8 jamp; r" m

2）标记步骤：

(1) 称取HRP25mg溶于1.25％戊二1醛溶液中，于室温静置过夜。5 k* k) F9 F5 V% ﹨

(2) 反应后的酶溶液经Sephadex G-25层析柱，用生理盐水洗脱。流速控制在1ml／1分钟，收集棕色流出液。如体积大于5ml，则以PEG浓缩至5ml。放置25ml小烧杯中，缓慢搅拌。: e6 V. j! |， b8 _

(3) 将待标记的*1体12.5mg用生理盐水稀释至5ml，搅拌下逐滴加入酶溶液中。

(4) 用1M PH9.5碳酸缓冲液0.25ml，继续搅拌3?小时。

HBsAg*特点（检测模式：临床*1体夹心法）：包被*1体为山羊多*。多*具有高亲和性和对*原各种表位的反应性。酶表*1体为与HBsAg有不同结合位点的鼠复合单位，可测得HBsAg变异样品，****检测的特异性（99.98%）****检测的灵敏度，应用Parl Ehrich 学说（PEI）HBsAg标准品，对ad标准品的灵敏度为0.05ng/ml对ay标准品灵敏度为0.025ng/ml

IgM*1体的检测用于传1染病的早期诊断中。间接法ELISA一般仅适用于检测总*1体或IgG*1体。如用*原包被的间接法直接测定IgM*1体，因标本中一般同时存在较高浓度的IgG*1体，后者将竞争结合固相*原而使一部份IgM*1体不能结合到固相上。因此如用*人IgM作为二*，间接测定IgM*1体，必须先将标本用A蛋白或*IgG*1体处理，以除去IgG的干扰。在临床检验中测定*1体IgM时多采用捕获包被法。先用*人IgM*1体包被固相，以捕获血1清标本中的IgM（其中包括针对*原的特异性IgM*1体和非特异性的IgM）。然后加入*原，此*原仅与特异性IgM相结合。继而加酶标记针对*原的特异性*1体。再与底物作用，呈色即与标本中的IgM成正相关。此法常用于病毒性1感1染的早期诊断。甲型肝1炎病毒（HAV）*1体的检测模式见图2-7。