13、检测前，要打开酶1标仪，使之稳定10分钟以上。

　　14、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。

　　15、待检样品要澄清，否则会影响结果。

　　16、温浴时间应遵守*盒规定。

　　17、应尽量做双孔实验，这样才能保证数据的准确性。

　　18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。

　　二、下面所提到的是针对我公司的ELISA产品会出现的问题及解决办法

　　1. 加入反应终止液后，没有吸光值或吸光值偏低。

　　a.原因：未加入酶标记物。

　　解决办法：请按照操作步骤进行。

　　b.原因：*盒内容物未能充分回。

　　解决办法：确定*盒内容物回温后再进行操作。

　　c.原因：室温太低。

　　解决办法：若室温太低(lt;19℃)，请于操作步骤4，适当延长温育时间。

　　d.原因：未使用*盒的清洗液清洗。

　　解决办法： 请用*盒内所提供的清洗液清洗。

　　e.原因：*盒已过有效期限。

　　解决办法：请更换成仍在有效期限内的*盒。

4）加底物显色

　　本法主要用于对病原体*1体的检测而进行传1染病的诊断。间接法的优点是只要变换包被*原就可利用同一酶标**1体建立检测相应*1体的方法。

　　间接法成功的关键在于*原的纯度。虽然有时用粗提*原包被也能取得实际有效的结果，但应尽可能予以纯化，以****试验的特异性。特别应注意除去能与一般健康人血1清发生反应的杂质，例如以E.Coli为工程酶的重组*原，如其中含有E.Coli成份，很可能与受过E.Coli感1染者血甭中的*E.Coli*1体发生反应。*原中也不能含有与酶标*人Ig反应的物质，例*自人血浆或**的*原，原装elisa*盒，如不将其中的Ig去除，试验中也发生假阳性反应。另外如*原中含有无关蛋白，也会因竟争吸附而影响包被效果。

1、 血1清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒1素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、 细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、 *匀浆：将*加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。5、 保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血1脂血。如果血1清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。