武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种*1体、免1疫学*盒、生化*、ELISA*盒、分子生物学*等多用途多属种的*产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免1疫学等生命科学领域。
1. 在无*1生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。
2. 分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择*1生素加入到每一个孔中。例如,两1性霉1素B推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。
3. 每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。
4. 确定*1生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2~3倍浓度的*1生素的培养液培养细胞2~3代。
武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种*1体、****学*盒、生化*、ELISA*盒、分子生物学*等多用途多属种的*产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、****学等生命科学领域。
心肌细胞首先合成108个氨基酸的BNP原,elisa*盒代测,称之为proBNP(BNP前体)。在受到心肌细胞的刺激后(例如,心肌细胞拉伸),proBNP在蛋白酶作用下列解为NT-proBNP(氨基末端- proBNP或N端-proBNP)和生物活性激1素BNP。两种多肽都释放进入血循环。两者来源相同并且等摩尔分泌。
BNP与NT-proBNP的不同点主要有如下几点:
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3、 细胞培养上清
取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
4、 细胞裂解液
1) 吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
2) 收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。
3) 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑1制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。