对于使用染料法的定量PCR反应，触屏*扩增仪，虽然有各种各样的PCR引物设计软件或者经验公式计算熔解温度（Tm值），但运用的公式不同、引物序列不同，Tm值的差异会很大。

引物的熔解温度决定了退火温度。而且模版中碱基的组合千变万化，*扩增仪，对于特殊片断，经验公式得到的数据不一定能得出准确的结果，退火温度细微的差异对结果都可能产生决定性的影响，因而“摸条件”一度是让人很头疼的问题。梯度PCR的出现部分解决了一些问题——在反应过程中每个孔的温度控制条件可以在指l定范围内按照梯度变化，根据结果，一步就可以摸索出****适合的反应条件。

不单退火温度，连变性温度和延伸温度都可以优化——对于多种聚合酶混合酶扩增如Invitrogen、Clontech、Promega的多数高保真Taq酶来说这个非常重要，*扩增仪厂家，因为Taq和校正酶的****l佳反应温度可能有显著差异，优化延伸温度就显得很重要。

PCR仪是在实验室中使用的设备，我们在使用PCR仪时，荧光定量*扩增仪，有什么特别注意呢？下面就跟随君意生物的小编一起来了解一下吧：

使用时，为确保安全和离心效果，仪器必须放置在坚固水平的台面上，工程塑料盖门上不得放置任何物品；样品必须对称放置并在开机前确保已拧紧螺母。我们应该经常检查转头及实验用离心管是否有裂纹、老化等现象，如有应及时更换。实验完毕后，需将仪器擦拭干净，以防腐蚀。机刷长度小于6mm时，必须及时更换。在仪器未停稳的情况下不得打开盖门。

不管是普通PCR仪扩增仪还是荧光定量PCR仪，都是一样的维护。