如今市面上的PCR仪器有很多品牌,很多的种类,我们在选购PCR仪器的时候,需要如何来进行选购呢?下面就跟随君意生物的小编一起来了解一下吧:
如今的PCR仪器主要分为三大类:标准PCR(终点PCR)、实时定量PCR(qPCR)以及数字PCR(dPCR)。前两者大家都很熟悉,而后者是这两年冉冉升起的新星。
标准PCR仪主要是产生大量的核酸序列供后续实验使用,比如测序、*,或仅仅是为了在凝胶上看看有没有合适的条带。
qPCR则是实时定量靶序列,通常被用来测定生物分子的丰度,而不是生成终产物。“有了qPCR,研究人员就不再关心PCR产物发生了什么。他们的问题是:开始时有什么?突变是否存在?”罗氏的技术服务科学家Joe Donnenhoffer谈道。
数字PCR也是定量的,但并非实时。反应发生在大量的微小分区中。这些分区很小,其中每个可能包含0或1个DNA分子。通过计算阳性反应的数量,研究人员能够*定量DNA。这比qPCR更为灵敏,也不需要标准曲线。
对于标准PCR仪和定量PCR仪之间的选择,研究人员通常都心里有数。不过,说到qPCR和dPCR之间的选择,研究人员就没那么有把握了,有时也需要帮助。据Bio-Rad的*营销经理Viresh Patel介绍,梯度PCR仪,这个选择通常取决于研究人员的应用和他们想要回答的问题。“当我们听到拷贝数分析或突变检测时,数字PCR通常能提供一个更好的*,更明确的*,*扩增仪PCR,”Patel说。不过对于高通量应用,qPCR则更实际。
PCR就是利用DNA聚合酶对特定*做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁*。PCR仪器温度控制性能的影响因素:
一、PCR仪器之间的差别对实验结果的影响。如前所述,没有任何两台PCR仪器的温度控制是一模一样的。相对于预设的温度模块温度总是偏高或偏低,就是同一模块不同的孔之间,PCR仪,温度有时也会不一样,相差可能达几摄氏度之多。一些PCR仪温度控制性能的不足造成的后果是:当PCR仪的模块温度在升温时,荧光定量PCR仪,温度过冲或不足,不能准确的达到预设的平台温度。
二、温度控制技术的差别对实验结果的影响。导致PCR仪温度控制性能优劣的因素,首先是温度控制技术。调节PCR仪模块的温度,使其达到并保持在某一温度有很多方式。每一种方式都有优点和缺点。另外,这些技术被运用控制的水平对于温度控制的水准是很重要的,且有很大不同。大多数PCR仪器的温度控制性能是很差的。在单一或多传感器控制机制上的不同显而易见的引起了温度的不均一性。