根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,*扩增仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类。
*扩增PCR仪的使用方法:
PCR由变性--退火(复性)--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至90~95℃一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,PCR仪,温度降至55~60℃,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在DNA聚合酶的作用下,于70~75℃,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,荧光定量PCR仪,按碱基配对与半保留*原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留*链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留*链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的*扩增放大几百万倍。
梯度PCR仪是PCR仪的一种,如今梯度PCR仪更多的应用于科研、教学机构。君意生物的小编就和大家一起来了解一下梯度PCR仪:
一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。因为被扩增的不同的DNApian段其****适合的退火温度不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的****适合退火温度进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样既节约时间,也节约经费。在不设置梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。正真的梯度,是每一排管都有****的加热控温探头,2009年为止只有美****BI公司可以做到。其他的都是从两头的热传递来设计控温。