一、兔血管生成素2(ANG-2)ELISA*盒概述：

elisa*盒****我司实验室,规格齐全,价格合理,完善的售后服务.

【产品名称】：兔血管生成素2(ANG-2)ELISA*盒

【检测方法】：酶联****法/酶免法(ELISA)

【产品性状】：96T/48T，盒装液体

【贮    藏】：2-8°C

【有 效 期】：Elisa*盒二年，我公司Elisa*盒均为****批次，可放心购买。

【主要成分】：酶标板,*,标准品等。

【标    本】：****/血浆/细胞培养上清液/*匀浆/*液/尿液/分泌物

【质量承诺】：我们坚持对产品质量作不断的评估、*和****以确保您对我们产品的高度信任。

【待检样本】：体液、****、血浆、细胞培养上清液、尿液、*匀浆、心房水标本等

【样品采集】：Elisa*盒收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

ELISA*盒在国内有许多种叫法：例如：ELISA检测*盒、ELISA Kit、酶联*****盒、酶联****吸附测定*盒、酶联****分析*盒、酶免*盒等，比较常见的叫法是ELISA检测*盒、酶联****吸附测定*盒等 ELISA*盒自从60-70年代问世以来，得到全世界科研工作者的认可及推崇，在欧美及中国获得很大的推广，尤其是国内生化领域的长足发展。 Elisa生物试验是一种敏*高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其*稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在****学检验的各领域中。

二、实验原理：

用纯化的*包被微孔板，制成固相载体，往包被*的微孔中依次加入标本或者标准品、生物素化的*、HRP标记的亲和素，经过*洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成****终的*。颜色的深浅和样品浓度呈正相关。用*在450nm波长下测定OD值，计算样品浓度。

三、样品收集、处理及保存方法

1）****-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内*的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将****和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）*匀浆-----将*加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或*血。如果****中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

四、操作步骤：
1）取出ELISA*盒，室温（20-25℃）放置30分钟。
2）分组：取出96孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6个浓度）、空白孔、待测样品组。
3）标准品的稀释：准备小试管6 只，依次编好号码，先在各小试管中加入标准品稀释液100ul，然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中，充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第三只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul 加入第四只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第五只试管中，充分混匀；然后在该试管中取100ul，弃掉。第六只试管作为0 号标准品。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
4）加样：依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入50ul的蒸馏水；其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的*10ul。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
5）温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
6）洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒弃去，如此重复5 次，拍干。

7）加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液（空白对照孔除外）。
8）温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
9）洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置15-30s，充分清洗酶标板5次，用吸水纸*拍干。
10）显色：各孔加入显色剂A液50ul后，再加入显色剂B液50ul。
11）终止：25-37℃下避光反应10-15分钟，加入50ul终止液。
12）读板：在450nm波长读取各孔的OD值。
注：读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹，读板时间控制在终止反应后的30分钟内，以免影响准确性。

五、兔血管生成素2(ANG-2)ELISA*盒性能特点： 

一、****、灵敏、特异的*； 二、稳定的重复性和可靠性； 

三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体； 

四、适用****、血浆、*匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；

五、节省实验经费。 

六、注意事项：
1）实验操作中必须使用一次性吸头，避免交叉污染。
2）加样：加样时，要控制加样速度，避免****孔与****后一孔间的时间间隔过大，否则将会导致不同的预孵育时间，从而影响实验的准确性以及重复性。
3）孵育：严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化，如果颜色较深，请提前加入终止液终止反应。
4）建议实验前预测样品含量，如样品浓度过高，应对样品进行稀释，计算结果时乘以相应的稀释倍数。
5）建议使用本*盒时先做预实验（即先做标准曲线，试用几个标本），如果对本*盒有任何疑问，可和所购经销商联系，如果因运输过程导致*盒失效，可要求调换，但概不承担产品本身以外的任何损失。
七、兔血管生成素2(ANG-2)ELISA*盒订货说明：

1）卖方确保所订产品与目录技术指标保持一致；

2）为了确保买方产品在运输中的质量，对有特殊要求的低温产品予以湿冰运输。

3）收到货物后如出现质量问题，买方需在收到货物一个月内向卖方提出书面异议。买方逾期不提出异议，视为货物符合其要求，卖方不付任何责任。

4）出现质量以外的问题，如*损等，买方应在收货后一个周内提出。买方未按时提出异议，视为该产品合格。