ELISA*盒的操作方法——间接法
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1.用包被缓冲液将已知*原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;
2.次日洗涤3次;
3.加一定稀释的待检样品(未知)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;
4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二(*)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分钟,玉米赤霉烯酮ELISA*盒厂家,洗涤;
6.然后用DDW洗涤。
其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。
Elisa*盒原理及用途
本*盒采用间接竞争ELISA方法检测肌肉组织、牛奶等样品中的米松(Dexamethasone,玉米赤霉烯酮ELISA*盒报价,DEX),*盒由预包被偶联*原的酶标板、酶标记物、、标准品及其他配套*组成。检测时,加入标准品或样品溶液,样本中的米松药品和酶标板上预包被偶联*原竞争*米松药类,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样本吸光度值与其所含米松药品含量成负相关,与标准曲线比较即可得出样本中米松药品的残留量。
ELISA*盒的操作方法——双夹心法
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,玉米赤霉烯酮ELISA*盒,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M*0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或*浅,依据所呈颜色的深浅,以“ ”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。