Elisa*盒——Elisa实验常见问题及解决方案
背景深,全部呈有色(通常的Elisa背景值ODlt;0.2)
1 洗涤不充分,洗后未拍干,样品中其它成分残留或酶标记物残留 洗液准确配制;充分洗涤,静置15秒,酶联ELISA*盒,拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用,不要反复使用,否则易造成污染。
2 底物污染,未避光保存,出现颜色 弃去底物,重新配置
3 样品稀释液污染 弃去稀释液,重新配置
4 吸头重复使用,未洗净或消毒不 吸头尽可能一次性使用
5 不正确的孵育时间,温度(尤其是底物孵育的时间) 常用的温育温度有37℃和室温,其次是43℃和2~8℃。完全按照说明书要求。
6 偶联*(strept*idin-HRP)浓度过高 按照说明书调整到合适的浓度
7 ELISA板子不正确的贮存 酶标板贮存于2-8 ℃;使用结合力低点的Elisa板
8 没有正确封闭 在标准品稀释液中加入动物蛋白或延长封闭时间
9 样本溶血严重 建议使用非溶血或轻微溶血样本,严重溶血样本会导致背景偏高。
ELISA*盒的试验原理
*盒是固相夹心法酶联吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的*同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,酶联ELISA*盒厂家,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
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ELISA*盒-ELISA检测原理介绍
酶联吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)指将可溶性的*原或结合到聚乙烯等固相载体上,酶联ELISA*盒公司,利用*原结合专一性进行反应的定性和定量检测方法。它是应用比较多的一种酶技术。ELISA*盒(ELISAKits)已成为药品和植物病理学研究中的常用诊断工具,是检测组织提取液和细胞培养液中目标/*原的理想工具,也是重要的质量控制手段。