lipo3000-博特龙技术有限公司

腹0水的纯化

采集复水后，12 000 r/min 离心 15 min，lipo3000，去掉 沉淀等杂质。往离心后的腹0水中加入等体积的 PBS，并添加*铵固体至 50% 饱和，静置 2 h，12 000 r/min离心15 min，弃 上 清，用 PBS 重 新 溶 解 沉 淀，然 后 再次加入*铵固体至 45% 饱和，静置两个小时左右，12 000 r/min 离心 15 min 弃去上清，用少量 PBS 溶解沉淀，即得到较纯的*0体，对 PBS 透析除去*铵，透析时间为24 h，透析过程中更换透析液两至三次。

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博奥龙公司主要产品有*0体制备*产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用*原*0体、1200多种二*，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二*；品类齐全的内参标签*0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关*及诸多特色产品和特色技术服务。

在McAb的研制过程中，动物免0疫是McAb制备过程中的关键步骤。但是传统动物免0疫方式通常需要二个月左右，不但耗时长，而且*原消耗的量大、对*原纯度要求高。本实验试图通过优化传统免0疫小鼠的方法，大大缩短动物免0疫时间并减少了*原的消耗量，为进一步组装患者肿0瘤组织及血0清中AFP水平检测的*盒打下良好的基础，为临床研究、肿0瘤的诊治提供更为有效的_丁．具。

材料与方法

一、材料

AFP购自上海领潮公司。SP2／0骨0髓瘤细胞(中科院上海细胞库)。8～12周龄Balb／c小鼠(第四军0医大学实验动物中心)。SPF级。

二、方法

1．动物免0疫：将4只8～12周龄Balb／c小鼠随机分为两组，每组2只，分别命名为1号和2号(第yi组)、3号和4号(第二组)。第yi组按常规免0疫方法进行免0疫一…，第二组采用改良的免0疫方法进行免0疫。免0疫前静脉采集少量血液，析出血0清作为后续检测的阴性对照血0清。

第yi组：AFP50ug(50肚1)与等量福氏完全佐剂(Sigma，美国)混合，充分乳化后注入8～12周龄Balb／c小鼠腹腔，2周后用同量*原加不完全福氏佐剂(Sigma，美国)腹腔注射，4周后用同量*原加不完全福氏佐剂腹腔注射，融合前3 d作腹腔注射加强免0疫。