2周快速鼠多*制备佐剂-博特龙(在线咨询)

由于改良免0疫法只需二次基础免0疫而常规免0疫法则需要2倍于改良法的免0疫次数，所以改良法*原用量明显少于常规法，从而大大减少了实验成本的消耗。

此外，本实验通过对比两种免0疫方法的细胞融合率及*0体阳性率，发现改良免0疫法均显著高于常规免0疫法。

经过后续实验，证明改良法免0疫小鼠的杂交瘤细胞经二次克0隆化后，*0体阳性率可达检测孔的90％以上。杂交瘤细胞体外连续传代培养，并冻存复苏后仍具有分泌AFP—McAb的能力，并经染色体计数结果表明已成功获得一株AFP—McAb细胞株。这表明改良法与常规方法具有同样的有效性和稳定性。

【摘要】 目的建立一种快速制备甲胎蛋白单克0隆*0体(AFP—McAb)杂交瘤细胞系的方法。 方法 以常规和改良两

种方式同时免0疫8～12周Balb／c小鼠，取小鼠脾细胞与骨0髓瘤细胞SP2／0融合并行次黄*呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养。

用间接酶链免0疫吸附试验法(EI。ISA)筛选阳性克0隆株，并建立细胞系。 结果 在较短时间内，改良法能获得高0效价的免0疫

*0体，与常规免0疫法相比有*显著差异(Plt;0．001)，同时改良法的细胞融合率和*0体阳性率也显著高于常规免0疫法

(Plt;o．001)。筛选获得的高0效分泌*人AFP—McAb的阳性杂交瘤细胞珠进行了初步鉴定。 结论 新的改良方法优化了

常规的McAb制备中动物免0疫程序，并能成功筛选出AFP—McAb杂交瘤细胞系。

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名称：QuickAntibody-Ra*it8W

货号：KX0210045

含量：1ml

用途：通过 8 周 3 针的标准免0疫程序制备兔子多克0隆*0体，ELISA 滴度（Cutoff 值为 0.1000）可达到

1:10000-1:1000000。

备注：常温运输，2-8oC 保存，无菌取用，有效期 18 个月。（切勿冻存！）

使用方法

1. 用生理盐水将*原稀释到 2 倍*终浓度（按每针次 100μl 用量配制）。备注：推荐使用的*原用量为（1）免0疫原性较弱的亚单位蛋白*原每针次 20-50μg；（2）免0疫原性较强的灭活全病毒或全*以及病毒样颗粒*原每针次 5-10μg。

2. 充分混匀佐剂，无菌条件下取出所需用量（按每针次 100μl）与*原按体积比 1:1 迅速混匀。备注：本佐剂产生沉淀属正常现象，2周快速鼠多*制备佐剂，与*原混合操作越快越好。

3. 通过后腿小腿肌肉注射免0疫兔子，每只兔子注射 200μl。备注：（1）本佐剂与*原混合后产生沉淀属正常现象，抽入针管前应充分混匀，抽入针管后应尽快注射； （2）客户也可根据各自的实验习惯选择皮下0注射或皮内注射进行免0疫。

4. 第 21 天和第 42 天按同样方式分别加强免0疫 1 针。备注：每次佐剂和*原现配现用，注射部位同初次免0疫。