异硫qing酸荧光素(FITC)是免0疫分析中*常用的荧光物质,FITC-酪胺信号放大系统可显著增强基于辣根过氧化物酶标记的ELISA和免0疫组化的检测灵敏度。
FITC-酪胺在辣根过氧化物酶催化下氧化,产物迅速共价结合在固定相蛋白质上,再检测FITC(荧光检测或用标记的*FITC*0体检测)。
通过此技术,可显著提高检测的灵敏度和降低*的使用量。
信号放大首0选生物素-酪胺信号放大*盒(链接),但如果样品存在含生物素等情况,可以选择本*盒。
注:对于灵敏度要求不是*高的普通实验室的染胶实验,一般染色10-20分钟(可以将100ng含量以上的蛋白染出条带),低背景,无需脱色,直接观察或者拍照;
对于灵敏度要求*高的染胶实验,一般可采用染色1-2小时(可以将10ng含量蛋白染出条带),低背景,无需脱色,直接观察或者拍照;
一般染色2小时后,蛋*带基本不会再加深,沉淀型TMB单组份,而背景会继续加深,所以一般建议染色不要超过2小时。
注意事项
1. 染液在 Gill 氏苏0木0精 2号配方基础上改良而成,适合于Hamp;E染色和免0疫组化的复染。染色时根据实验室自身条件和实验对象自行摸索*佳染色时间,以上操作方法为初次使用本产品者提供参考。
2. 如果稀释本产品使用,建议使用蒸馏水做 2 倍稀释,并适当延长染色时间,稀释的染液不能长时间保存。
3. 染液可重复使用多次,直到染色效果不满意更换。染液可能由于染色时玻片将过多的液体引入而导致寿命缩短。另外,为防止交叉污染,在染不同的组织或细胞片时应该更换染液,用过的染液单独保存,不要倒回原包装。