由于改良免0疫法只需二次基础免0疫而常规免0疫法则需要2倍于改良法的免0疫次数,所以改良法*原用量明显少于常规法,从而大大减少了实验成本的消耗。
此外,本实验通过对比两种免0疫方法的细胞融合率及*0体阳性率,发现改良免0疫法均显著高于常规免0疫法。
经过后续实验,证明改良法免0疫小鼠的杂交瘤细胞经二次克0隆化后,*0体阳性率可达检测孔的90%以上。杂交瘤细胞体外连续传代培养,并冻存复苏后仍具有分泌AFP—McAb的能力,并经染色体计数结果表明已成功获得一株AFP—McAb细胞株。这表明改良法与常规方法具有同样的有效性和稳定性。
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博奥龙公司主要产品有*0体制备*产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用*原*0体、1200多种二*,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二*;品类齐全的内参标签*0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关*及诸多特色产品和特色技术服务。
名称:QuickAntibody-Ra*it8W
货号:KX0210045
含量:1ml
用途:通过 8 周 3 针的标准免0疫程序制备兔子多克0隆*0体,ELISA 滴度(Cutoff 值为 0.1000)可达到
1:10000-1:1000000。
备注:常温运输,2-8oC 保存,无菌取用,有效期 18 个月。(切勿冻存!)
使用方法
1. 用生理盐水将*原稀释到 2 倍*终浓度(按每针次 100μl 用量配制)。备注:推荐使用的*原用量为(1)免0疫原性较弱的亚单位蛋白*原每针次 20-50μg;(2)免0疫原性较强的灭活全病毒或全*以及病毒样颗粒*原每针次 5-10μg。
2. 充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需用量(按每针次 100μl)与*原按体积比 1:1 迅速混匀。备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与*原混合操作越快越好。
3. 通过后腿小腿肌肉注射免0疫兔子,每只兔子注射 200μl。备注:(1)本佐剂与*原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射; (2)客户也可根据各自的实验习惯选择皮下0注射或皮内注射进行免0疫。
4. 第 21 天和第 42 天按同样方式分别加强免0疫 1 针。备注:每次佐剂和*原现配现用,注射部位同初次免0疫。
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甲胎蛋白(AFP)是一种胎儿特异性糖蛋白,分子量约70,000~72,弗氏完全佐剂,000道尔顿^,在胚胎肝0脏和卵黄囊中合成,正常人血中含量甚微。1972年有人首0次报道开放性神0经管畸形胎儿、羊水中有高水平的AFP。若胎儿羊水中AFI’值高于均值常见于患无脑儿或脊柱裂的胎儿,亦见于其他多种畸形,如先天0性shen病、食道或肠闭锁、囊0性水瘤、骶尾部畸胎瘤、Rh血型不和、先天愚型、先0天性性腺发育不全等∽J。1983年发现母体血0清AFP水平的降低与唐氏综合征有密切关系一。。因此制备高0效特异的AFP单克*0体(McAb)具有重要的意义。