4.3.5 对照和标本
每次实验都要包含适当的对照以用于分析检测体系的效能。定量 ELISA 要以标准品进行比较。每次实验要设以下对照:
4.3.6 本底对照:不加标本,其它*都加,可以帮助分析非特异性本底的原因。将实验结果减去本底以保证实验之间的可比性。
4.3.7 阴性对照:加已知的阴性参考品。
4.3.8 阈值对照:加弱阳性参考品用于确定阳性的临界值。
4.3.9 阳性对照:加强阳性参考品以确定*大线性信号。
对照和标本都用 BSA 稀释/封闭液进行稀释以保证*低本底,所有实验*好做双份。
5.*配制
所有*当日配制
5.1 1X 包被液:用蒸馏水稀释浓缩包被液(1ml 浓缩包被液 9ml 蒸馏水)
注意:如果在 10X 中出现结晶,加热到室温或 37℃混匀并再溶解。
实验流程管理SAMI软件采用直观的流线型编程方式,可以一目了然的看到样品加了什么液体、进行了哪些操作,*后回到了哪里。同时SAMI对方法进行时序优化,提高实验效率。
数据的管理在杂交瘤筛选过程中,会产生浩如烟海般的数据,只要稍微偏差,就有可能带来难以承受的后果,甚至整个项目从头再来。所以,我们需要一个有效的软件来管理所有的数据,包括孔板的Barcode、样品孔的信息、实验运行时间和方法等等,让我们的结果有源可查、有据可依。数据管理软件DART不仅可以实现数据的管理,同时,也可以和实验室管理系统连接,杂交瘤添加因子,实现数据的无缝连接。
4.确定反应条件
4.1 杂交瘤筛选
用间接 ELISA 方法筛选*0体
4.2 检测*原或*0体
按照推荐的方法和步骤可以满足大多数实验的要求,反应时间、温度和*浓度等可以根据实验需要进行调整 每一步都应该进行系统性评价以便获得*佳的实验条件。*通过倍比稀释以确定*佳 浓度。选择合适的对照,以确定实验中存在的问题,发现引起错误结果和高本底的原因。 确定实验方案和样品数量后,可以准备所需要的各种材料和*。实验前,建议所有的* 恢复到室温并混匀。