新型乳剂-博特龙(在线咨询)

QuickAntibody的一个重要用途是可方便地用于制备小鼠多克0隆*0体。常规多克0隆*0体制备多使用兔子，不但免0疫针次多、*原用量大和*0体产生慢，而且由于技术要求较高而往往需要委

托专门单位制备。使用QuickAntibody免0疫佐剂，任何实验动物人员均可方便快速地制备小鼠多克0隆*0体，标准免0疫程序只需要简单地免0疫5只小鼠，即可在五周后获得1ml高质量的小鼠多克0隆*0体。（强烈推荐使用本佐剂制备小鼠多克0隆*0体，1ml高质量的小鼠多克0隆*0体足以满足绝大多数用户的实验需求，包括用于酶联免0疫、免0疫印迹、流式细胞、免0疫组化和免0疫沉淀等）。

QuickAntibody建议常温运输，2~8oC保存，无菌取用，有效期18个月。

使用方法

1. 用生理盐水将*原稀释到2倍*终浓度（按小鼠每针次50μl、家兔每针次100μl用量配制）。备注：推荐使用的*原用量为小鼠每针次10-20μg、家兔每针次20-50μg。

2. 用振荡器充分混匀佐剂，无菌条件下取出所需用量（按小鼠每针次50μl、家兔每针次100μl）与*原按体积比1:1混合，并用振荡器剧烈振荡5-10min，直至静止放置10min水油相不分层。备注：与*原混合前佐剂分层属正常现象，但必须充分混匀后才能取用。

3. 通过皮下或肌肉单点注射免0疫动物，小鼠每针次100μl，家兔每针次200μl。

（1）佐剂与*原混合后应尽快注射，新型乳剂，若放置时间较长出现水油相分层，则必须按上述步骤2重新振荡混匀；

（2）抽入针管前应摇匀，抽入针管后应尽快注射；

（3）尽量选择引流淋巴0结附近（如腋窝和腹0股0沟附近）的皮下或肌肉进行免0疫。

杂交瘤细胞的筛选与克0隆

细胞融合后，培养于添加了 HAT 的选择培养基的 96 孔板中，培养一天后半定量换液，培养基更换时应注意轻缓，第 5 天能在显微镜下看到明显的杂交瘤细胞克0隆，第 7 天左右，杂交瘤细胞能长至铺满孔底约 1 /10。此时进行 ELISA 检测养心细胞孔。取细胞培养上清对 MRJ 融合蛋白进行间接 Elisa检测，筛选出能分泌*0体的杂交瘤细胞孔，有限稀释法对阳性孔进行亚克0隆，经过 3 次亚克0隆后，获得了能够稳定 分 泌 * MRJ 融合蛋白单克0隆*0体的细胞株。对杂交瘤细胞株按从 96 孔板-24 孔板-10 cm 培养皿的顺序扩大培养，部分细胞用于腹0水制备单*，部分细胞冻存备用。