博特龙技术有限公司-生物素标记*盒

乳化器操作视频

说明：

1、本产品单次乳化液体量范围约为250ul~20ml。

2、本产品标配一支乳化针头。

3、针头清洗方法：用75%酒精擦拭两遍即可（第二遍用新*）。

4、乳化时间建议：一般1-10ml乳化量3-5分钟即可，生物素标记*盒，*多不要超过10分钟。

5、注意乳化器操作视频中的操作方式，整体从上到下，局部上下摆动前进。

7.1.5 加二*

1. 每孔加 100 uL 二*。

2. 室温反应 1 小时。

3. 甩掉板中液体并拍净残液，洗板 3 次。

7.1.6 显色反应

1. 每孔加 100 uL 底物，室温反应 1~ 15 分钟。

2. 每孔加 50ul 终止液。

3. 测 OD 值，检测波长 450nm。

7.2 直接 ELISA

*原包被液：将*原稀释在 1X 包被液中，浓度 1～10μg/ml。

酶标*0体：稀释到 1X BSA 封闭液中，稀释度参考条件优化方法。

7.2.1 加*原

1. 在酶标板中每孔加入 100μl *原包被液。

2. 室温孵育 1 小时。

3. 甩掉板中液体并拍净残液，每孔加入洗涤液 200ul，洗涤 3 次并拍净残液。

7.2.2 封闭

1. 每孔加 200μ1X BSA 封闭液。

2. 37℃ 反应 45 分钟，甩掉板中液体并拍净残液，每孔加入洗涤液 200ul，洗涤 3 次并拍

净残液。

工作浓度：

1. 融合和亚克0隆阶段：10% (v/v) 加入到完全培养基中。

2. 细胞扩大培养和复苏阶段：2.5%-5% (v/v) 加入到完全培养基中。

注意：Hybridoma Feeder 添加因子适用的基础培养基为RPMI 1640、IMDM和DMEM，其它培养基未经测试。Hybridoma Feeder 添加因子不可代替血0清使用，只作为细胞培养添加剂使用。