QuickAntibody的一个重要用途是可方便地用于制备小鼠多克0隆*0体。常规多克0隆*0体制备多使用兔子,细胞转染*,不但免0疫针次多、*原用量大和*0体产生慢,而且由于技术要求较高而往往需要委
托专门单位制备。使用QuickAntibody免0疫佐剂,任何实验动物人员均可方便快速地制备小鼠多克0隆*0体,标准免0疫程序只需要简单地免0疫5只小鼠,即可在五周后获得1ml高质量的小鼠多克0隆*0体。(强烈推荐使用本佐剂制备小鼠多克0隆*0体,1ml高质量的小鼠多克0隆*0体足以满足绝大多数用户的实验需求,包括用于酶联免0疫、免0疫印迹、流式细胞、免0疫组化和免0疫沉淀等)。
QuickAntibody建议常温运输,2~8oC保存,无菌取用,有效期18个月。
*果蝇 MRJ 蛋白单克0隆*0体的制备和鉴定
摘要: 制备* 果 蝇 MRJ 蛋白单克0隆*0体可用于研究果蝇 mrj 的 生 物 学 功 能,使 用 IPTG 诱 导 重 组 质 粒pET28a-mrj 在大肠杆0菌 Rosetta 中表达,重组蛋白经过 Ni-IDA 凝胶柱亲和纯化后免0疫 BALB/c 小鼠。然后取免0疫好的小鼠的脾0脏细胞与小鼠骨0髓瘤细胞 SP2 /0 融合,经克0隆和筛选获得了能分泌*果蝇 MRJ 蛋白单克0隆*0体的杂交瘤细胞株。腹0水制备后获得单克0隆*0体,通过 ELISA 和 Western Blot 对所获得的*0体进行鉴定,结果表明所制备单克0隆*0体能够特异性结合于原核及真核细胞表达的 MRJ 蛋白,可用于研究 mrj *的生物学功能。
关键词: mrj; 细胞融合; 单克0隆*0体
通过后腿小腿肌肉注射免0疫小鼠(视频),每只小鼠注射100μl。
备注:本佐剂与*原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射。
第21天按同样方式加强免0疫1针。
备注:每次佐剂和*原现配现用。
第35天采微量尾血进行ELISA测定,*0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行*原冲击免0疫和脾细胞融合。