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博奥龙公司主要产品有*0体制备*产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用*原*0体、1200多种二*,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二*;品类齐全的内参标签*0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关*及诸多特色产品和特色技术服务。
β-actin的蛋白水平通常不会发生改变,因此被广泛用于Western时上样量是否一致的参照。也常被用于免0疫染色观察细胞的微丝结构。在用作Western的参照时,Actin*0体和Tubulin*0体的主要不同之处在于两者所识别蛋白的分子量不同,这样可以选择合适的参照在同一块胶同一张膜上实现同时检测目标蛋白和参照蛋白。
保存条件:
Actin*0体-20℃保存,Western一*稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一*稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
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水佐剂免0疫步骤
步骤一:用生理盐水将*原稀释到2倍*终浓度。备注:推荐使用的*原用量为(1)免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg(通常为10~20μg);(2)免0疫原性较强的灭活全病毒和病毒样颗粒每针次0.1~10μg(通常为1~2μg)。
步骤二:充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需量与*原按体积比1:1迅速混匀。备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与*原混合操作越快越好。
步骤三:通过后腿小腿肌肉注射免0疫小鼠,每只小鼠100μl。备注:本佐剂与*原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射。
步骤四:第21天按同样方式加强免0疫一针。备注:每次佐剂和*原现配现用。
步骤五、第35天采微量尾血进行ELISA测定,*0体滴度应在1:10000~1:10000000 范围内, 随后即可摘眼球采全血或进行脾细胞融合。备注:若*偶尔情况下*0体滴度达不到实验需求,可在第42天再按同样方式加强免0疫一针。
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什么是单克0隆*0体?
单克0隆*0体(MAb),是针专一的*原决定簇产生的*0体,单克0隆技术又名杂交瘤技术起源于1975年,由G.K?hler和Milstein创立。主要原理是利用产生*0体的B细胞与肿0瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞,生产*0体。
单克0隆*0体制备的原理是什么?
要制备单克0隆*0体需先获得能合成专一性*0体的单克0隆B淋巴细胞,但这种B淋巴细胞不能在体外生长。而实验发现骨0髓瘤细胞可在体外生长繁殖,应用细胞杂交技术使骨0髓瘤细胞与免0疫的淋巴细胞二者合二为一,得到杂0种的骨0髓瘤细胞。这种杂0种细胞继承两种亲代细胞的特性,小鼠*大鼠IgM,它既具有B淋巴细胞合成专一*0体的特性,也有骨0髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性,用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群,可制备*一种*原决定簇的特异单克0隆*0体。