QuickShuttle-293-苏州博特龙(图)

1.以 24 孔细胞板转染实验为例，推荐一次（即每孔）转染的低内毒0素质粒 DNA 用量为 1~2μg、转染*用量为 3~5μl（请在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告*进行优化），质粒和转染*可用无菌生理盐水稀释。

2.QuickShuttle 经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试，虽然在实验中推荐使用 DMEM，但有实验结果表明 M199 能够显著增强 QuickShuttle 对 Vero 细胞和 293FT 细胞的转染效果，因此可尝试使用不同培养基对转染条件进行优化。

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博奥龙公司主要产品有*0体制备*产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用*原*0体、1200多种二*，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二*；品类齐全的内参标签*0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关*及诸多特色产品和特色技术服务。

注意事项：

1. 质粒 DNA：请用能够去除内毒0素的方法制备高质量的质粒 DNA。

2. 稀释液：0.85%（W/V）生理盐水，用低内毒0素纯水配制，高压消毒或除0菌过滤。

3. 培养基：经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试，QuickShuttle-293，推荐使用含 5~10%牛血0清的DMEM，若转染效果不理想可尝试其它培养基。

4. 以 24 孔细胞板转染实验为例，推荐每孔低内毒0素质粒 DNA 用量为 2μg、转染*用量为 3~5μl，请在正式实验前根据不同培养基用报告*进行优化。

5. 立传立转要求使用生长旺盛的细胞，即细胞生长至 80-90%成片或刚长满。若使用生长过老的细胞，将明显影响立传立转的效率。

6. 立传立转对细胞状态要求较高，如果转染效果不理想，可按 QuickShuttle-Enhanced 的转染方法（见本说明书第 4 页），在细胞贴壁后进行标准转染操作。

已有众多的文献报道，脂质体本身会参与细胞生理活动，引起*表达的上调或下调。如参与PKC（蛋白激酶C）通路调节(Biochemistry.1992 Sep 22;31(37): 9025-30)；如*ATP酶的活性(Biochim Biophys Acta.2008 Apr;1777(4):362-8)；如与线粒体膜发生作用(J Biol Chem. 1989 Jan 25;264(3):1508-15)；转染siRNA造成脱靶效应等等。细胞毒性的大小往往意味着对细胞生理活动影响的大小，脂质体这些作用是造成细胞毒性的根本原因。这会对相关研究数据产生严重的干扰，甚至影响研究的结论。这已引起了许多研究者的注意。


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