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博奥龙公司主要产品有*0体制备*产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用*原*0体、1200多种二*,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二*;品类齐全的内参标签*0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关*及诸多特色产品和特色技术服务。
使用方法
1. 将新鲜消化的 BHK-21 细胞接种到 24 孔细胞板中,每孔 1~2×105细胞,1ml 完全培养基。备注:可在生长旺盛的细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染,无需 18~24 小时的等候时间。
2. 将 2μg 质粒 DNA 和 3~5μl 转染*分别稀释到 50μl 生理盐水中。备注:质粒 DNA 和转染*的*适用量需要根据不同培养基来优化,但理论上不超出 1~2μg 和 3~5μl 范围。
3. 合并上述两溶液并混匀。备注:无需其它转染*所需的 10~30 分钟的等候时间。
4. 将上述复合物直接加入到细胞培养基中,用加样器吸打混匀。备注:转染复合物可直接加入含血0清的细胞培养基中进行转染。
5. 将细胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中进行培养。备注:无需在转染后 4~6 小时补加血0清或更换培养基。
6. 24~72 小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。
转染*简介:
其中病毒载体的特点是整和效0率高, 可使外源*在宿主细胞中长期表达,缺点是存在潜在的安全危险性。电穿孔法及显微注射法的特点是转染率较高,缺点是需要昂贵的仪器,前者对细胞的损伤较大,超快型转染*,后者在导入DNA 时需要一个细胞一个细胞地注射,不适合大量细胞研究的需要。
人们一直在寻找更有效、毒性小同时对研究影响也小的转染*。由于脂质类转染*对细胞的毒性是由其脂质特性决定的,众多的研究者和生物公司将新一代转染*的开发聚焦在非脂质体的聚合物上,并已有一些优0秀的*产品上市。
使用方法:
1. 转染前 18~24 小时接种细胞到 24 孔细胞板中,每孔 5~10×104细胞,1ml 完全培养基。备注:如果筛选*药性稳定细胞系,可以考虑简化的实验步骤,即在细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染,无需 18~24 小时的等候时间。
2. 将 2μg 质粒 DNA 和 3~5μl 转染*分别稀释到 50μl 生理盐水中。备注:质粒 DNA 和转染*的*适用量需要根据不同培养基来优化,但理论上不超出 1~2μg 和 3~5μl 范围。
3. 合并上述两溶液并混匀。备注:无需其它转染*所需的 10~30 分钟的等候时间。